Tartalomra ugrás
NCI-H146 sejtek
Szövet
Tüdő
Betegség
Kissejtes karcinóma
Áttétes hely
Csontvelő
Szinonimák
H146, H-146, NCIH146

Dokumentumok

NCI-H146 sejtek

Cell line · Termékszám 300182

Az NCI-H146 sejtvonalat A.F. Gazdar és munkatársai állították elő 1979-ben egy kissejtes tüdőrákban szenvedő beteg pleurális folyadékából. A csontvelő...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás
Az NCI-H146 sejtvonalat A.F. Gazdar és munkatársai 1979-ben egy kissejtes tüdőrákban szenvedő beteg mellhártyájának folyadékából nyerték. A csontvelőmintát a terápia előtt vették.
Szövet
Tüdő
Betegség
Kissejtes karcinóma
Áttétes hely
Csontvelő
Szinonimák
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Transzplantálható tumorokat képez meztelen egerekben, amelyek szövettanilag hasonlítanak az eredeti biopsziás mintából származó tumorsejtekhez
Ploidiaállapot
Aneuploid
MSI állapot
Stabil (MSS)
Kariotípus
Ez egy közel triploid emberi sejtvonal. A kromoszómaszám 68, de gyakran előfordultak 66, 70 és 71 kromoszómával rendelkező sejtek is. Az x kromoszómák párosítva voltak, és a QM festett preparátumokban nem volt Y kromoszóma kimutatható.

04Azonosítók

Hivatkozás
NCI-H146 (Cytion katalógusszám: 300182)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1473

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Inzulinszerű növekedési faktor II receptor (IGF II)
Fehérjeexpresszió
A sejtek pozitívan festődnek vimentinre és keratinra, de negatívak neurofilament triplet fehérjére.
Antigén-expresszió
A vonal négy biokémiai marker emelkedett szintjét fejezi ki: neuronspecifikus enoláz, a kreatin-kináz agyi izoenzimje, L-DOPA dekarboxiláz és bombesinszerű immunreaktivitás
Izoenzimek
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotípus gyakorisági termék = 0,0009
Termékek
A sejtek viszonylag nagy mennyiségű c-myc mRNS-t termelnek, de a c-myc DNS-szekvenciák nem amplifikálódnak. A sejtek nem expresszálják a vazopresszint, az oxitocint vagy a gasztrin felszabadító peptidet.

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% hővel inaktivált FBS-szel egészítsük ki
Átültetés
A sejteket szubkultúrázni kell a szuszpenzió egy részének friss, új, friss tápfolyadékkal előretöltött sejttenyésztő lombikokba történő átültetésével. Alternatív megoldásként a klasztereket centrifugálással össze lehet gyűjteni és friss tápfolyadékban újra szuszpendálni.
Ültetési sűrűség
1–2 x 105 sejt/ml
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
A felolvasztás után hagyja, hogy a sejtek legalább 24-48 órán keresztül regenerálódjanak a fagyasztásból.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
59 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi