- Tissue
- Poumon
- Disease
- Carcinome à petites cellules
- Metastatic site
- Moelle osseuse
- Synonyms
- H146, H-146, NCIH146
Documents
Cellules NCI-H146
Cell line · Product number 300182
The NCI-H146 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1979 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The bone mar...
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01General information
- Description
- La lignée cellulaire NCI-H146 a été mise au point par A.F. Gazdar et ses collaborateurs en 1979 à partir du liquide pleural d’un patient atteint d’un cancer du poumon à petites cellules. L’échantillon de moelle osseuse avait été prélevé avant le début du traitement.
- Tissue
- Poumon
- Disease
- Carcinome à petites cellules
- Metastatic site
- Moelle osseuse
- Synonyms
- H146
- H-146
- NCIH146
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De type épithélial
- Tumourigenic
- Il forme chez la souris nue des tumeurs transplantables qui, d’un point de vue histologique, ressemblent aux cellules tumorales provenant de l’échantillon de biopsie d’origine
- Ploidy status
- Aneuploïde
- MSI status
- Stable (MSS)
- Karyotype
- Il s’agit d’une lignée cellulaire humaine quasi-triploïde. Le nombre modal de chromosomes est de 68, mais on a également observé fréquemment des cellules comportant 66, 70 et 71 chromosomes. Les chromosomes X étaient appariés, et aucun chromosome Y n’a été détecté dans les préparations colorées au QM.
04Identifiers
- Citation
- NCI-H146 (numéro de catalogue Cytion 300182)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1473
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- Récepteur du facteur de croissance analogue à l'insuline II (IGF II)
- Protein expression
- Ces cellules présentent une coloration positive pour la vimentine et la kératine, mais sont négatives pour la protéine triplet des neurofilaments.
- Antigen expression
- Cette lignée présente des taux élevés de quatre marqueurs biochimiques : l'énolase spécifique aux neurones, l'isoenzyme cérébrale de la créatine kinase, la L-DOPA décarboxylase et l'immunoréactivité de type bombésine.
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, produit de la fréquence des phénotypes = 0,0009
- Products
- Ces cellules produisent des quantités relativement élevées d'ARNm de c-myc, mais les séquences d'ADN de c-myc ne sont pas amplifiées. Elles n'expriment ni la vasopressine, ni l'ocytocine, ni le peptide libérant la gastrine.
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 10 % de sérum fœtal bovin (FBS) inactivé par la chaleur
- Subculturing
- Les cellules doivent être repiquées en transférant une partie de la suspension dans des flacons de culture neufs, préalablement remplis de milieu frais. Il est également possible de recueillir les amas par centrifugation, puis de les remettre en suspension dans du milieu frais.
- Seeding density
- 1 à 2 × 10⁵ cellules/ml
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Post-thaw recovery
- Après la décongélation, laissez les cellules se remettre du processus de congélation pendant au moins 24 à 48 heures.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- 59 ans
- Ethnicity
- caucasien
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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