Премини към съдържанието
Клетки NCI-H146
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Дребноклетъчен карцином
Място на метастазите
Костен мозък
Синоними
H146, H-146, NCIH146

Документи

Клетки NCI-H146

Cell line · Номер на продукта 300182

Клетъчната линия NCI-H146 е получена от А.Ф. Газдар и колеги през 1979 г. от плевралната течност на пациент с дребноклетъчен рак на белия дроб. Костният мозък...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание
Клетъчната линия NCI-H146 е получена от A.F. Gazdar и сътрудници през 1979 г. от плевралната течност на пациент с дребноклетъчен рак на белия дроб. Пробата от костен мозък е взета преди терапията.
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Дребноклетъчен карцином
Място на метастазите
Костен мозък
Синоними
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Окачване
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Образува трансплантируеми тумори в голи мишки, които хистологично приличат на туморните клетки от оригиналния образец за биопсия
Плоидност
Анеуплоидни
Статус на MSI
Стабилен (MSS)
Кариотип
Това е почти триплоидна човешка клетъчна линия. Модалният брой хромозоми е 68, но често се срещат и клетки с 66, 70 и 71 хромозоми. Х хромозомите са сдвоени, а в оцветените с QM препарати не е открита Y хромозома.

04Идентификатори

Източник
NCI-H146 (каталожен номер 300182 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1473

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
Рецептор за инсулиноподобен растежен фактор II (IGF II)
Експресия на протеини
Клетките се оцветяват положително за виментин и кератин, но са отрицателни за неврофиламентен триплетен протеин.
Експресия на антигена
Линията експресира повишени нива на четири биохимични маркера: неврон-специфична енолаза, мозъчен изоензим на креатинкиназата, L-DOPA декарбоксилаза и бомбезин-подобна имунореактивност
Изоензими
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, фенотипна честота Продукт = 0,0009
Продукти
Клетките произвеждат сравнително големи количества c-myc мРНК, но c-myc ДНК последователностите не се амплифицират. Клетките не експресират вазопресин, окситоцин или освобождаващ гастрин пептид.

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% топлинно активиран FBS
Пресаждане
Клетките трябва да се субкултивират, като част от суспензията се прехвърли в нови колби за клетъчни култури, предварително напълнени с прясна среда. Алтернативно, клъстерите могат да се съберат чрез центрофугиране и да се ресуспендират в свежа среда.
Плътност на засяването
1 до 2 x 105 клетки/ml
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяването оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване за поне 24-48 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
59 години
Етническа принадлежност
Кавказки