Gå direkte til indholdet
NCI-H146-celler
Væv
Lunge
Sygdom
Småcellet karcinom
Metastasested
Knoglemarv
Synonymer
H146, H-146, NCIH146

Dokumenter

NCI-H146-celler

Cell line · Varenummer 300182

NCI-H146-cellelinjen blev isoleret af A.F. Gazdar og medarbejdere i 1979 fra pleuravæsken hos en patient med småcellet lungekræft. Knoglemarven...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse
NCI-H146-cellelinjen blev afledt af A.F. Gazdar og medarbejdere i 1979 fra pleuravæske fra en patient med småcellet lungekræft. Knoglemarvsprøven blev taget før behandlingen.
Væv
Lunge
Sygdom
Småcellet karcinom
Metastasested
Knoglemarv
Synonymer
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Danner transplanterbare tumorer i nøgenmus, som histologisk ligner tumorceller fra den oprindelige biopsiprøve
Ploidistatus
Aneuploid
MSI-status
Stabil (MSS)
Karyotype
Dette er en næsten triploid menneskelig cellelinje. Det normale kromosomtal er 68, men celler med 66, 70 og 71 kromosomer forekommer også hyppigt. X-kromosomerne var parrede, og der blev ikke fundet noget Y-kromosom i QM-farvede præparater.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-H146 (Cytion katalognummer 300182)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1473

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
Insulinlignende vækstfaktor II-receptor (IGF II)
Proteinekspression
Cellerne farves positivt for vimentin og keratin, men er negative for neurofilament triplet protein.
Antigenudtryk
Linjen udtrykker forhøjede niveauer af fire biokemiske markører: neuronspecifik enolase, hjerne-isoenzym af kreatinkinase, L-DOPA-decarboxylase og bombesinlignende immunreaktivitet
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fænotypefrekvensprodukt = 0,0009
Produkter
Cellerne producerer relativt store mængder c-myc mRNA, men c-myc DNA-sekvenser bliver ikke forstærket. Cellerne udtrykker ikke vasopressin, oxytocin eller gastrin-frigørende peptid.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % varmeinaktiveret FBS
Oddyrkning
Cellerne skal subkultiveres ved at overføre en del af suspensionen til nye celledyrkningskolber, der er fyldt med frisk medium. Alternativt kan klyngerne opsamles ved centrifugering og resuspenderes i frisk medium.
Såtæthed
1 til 2 x 105 celler/ml
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne have lov til at komme sig over fryseprocessen i mindst 24 til 48 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
59 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk