Przejdź do treści
Komórki NCI-H146
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak drobnokomórkowy
Miejsce przerzutów
Szpik kostny
Synonimy
H146, H-146, NCIH146

Dokumenty

Komórki NCI-H146

Cell line · Numer produktu 300182

Linia komórkowa NCI-H146 została wyhodowana przez A.F. Gazdara i współpracowników w 1979 roku z płynu opłucnowego pacjenta cierpiącego na drobnokomórkowego raka płuca. Szpik kostny...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis
Linia komórkowa NCI-H146 została uzyskana przez A.F. Gazdara i współpracowników w 1979 r. z płynu opłucnowego pacjenta z drobnokomórkowym rakiem płuca. Próbka szpiku kostnego została pobrana przed terapią.
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak drobnokomórkowy
Miejsce przerzutów
Szpik kostny
Synonimy
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tworzy przeszczepialne guzy u nagich myszy, które histologicznie przypominają komórki nowotworowe z oryginalnej próbki biopsyjnej
Status ploidii
Aneuploid
Stan MSI
Stabilny (MSS)
Karyotyp
Jest to prawie triploidalna ludzka linia komórkowa. Modalna liczba chromosomów wynosi 68, ale komórki z 66, 70 i 71 chromosomami również często występowały. Chromosomy x były sparowane i nie wykryto chromosomu Y w preparatach barwionych QM.

04Identyfikatory

Źródło
NCI-H146 (numer katalogowy Cytion 300182)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1473

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Receptor insulinopodobnego czynnika wzrostu II (IGF II)
Ekspresja białek
Komórki wybarwiają się pozytywnie na wimentynę i keratynę, ale są ujemne dla białka tripletowego neurofilamentu.
Ekspresja antygenu
Linia ta wykazuje podwyższony poziom czterech markerów biochemicznych: enolazy swoistej dla neuronów, izoenzymu mózgowej kinazy kreatynowej, dekarboksylazy L-DOPA i immunoreaktywności podobnej do bombezyny
Izoenzymy
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, iloczyn częstości fenotypów = 0,0009
Produkty
Komórki wytwarzają stosunkowo duże ilości mRNA c-myc, ale sekwencje DNA c-myc nie są amplifikowane. Komórki nie wyrażają wazopresyny, oksytocyny ani peptydu uwalniającego gastrynę.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS inaktywowanym termicznie
Hodowla komórek w subkulturze
Komórki powinny być podhodowane poprzez przeniesienie części zawiesiny do nowych kolb do hodowli komórkowych wypełnionych świeżą pożywką. Alternatywnie, skupiska można zebrać przez odwirowanie i ponownie zawiesić w świeżej pożywce.
Gęstość wysiewu
1 do 2 x 105 komórek/ml
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu należy pozwolić komórkom dojść do siebie po procesie zamrażania przez co najmniej 24 do 48 godzin.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
59 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski