
- Tissue
- Pulmão
- Disease
- Carcinoma de pequenas células
- Metastatic site
- Medula óssea
- Synonyms
- H146, H-146, NCIH146
Documents
Células NCI-H146
Cell line · Product number 300182
The NCI-H146 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1979 from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The bone mar...
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01General information
- Description
- A linhagem celular NCI-H146 foi isolada por A.F. Gazdar e colaboradores em 1979 a partir do líquido pleural de um paciente com câncer de pulmão de pequenas células. A amostra de medula óssea foi coletada antes do início do tratamento.
- Tissue
- Pulmão
- Disease
- Carcinoma de pequenas células
- Metastatic site
- Medula óssea
- Synonyms
- H146
- H-146
- NCIH146
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Tumourigenic
- Forma tumores transplantáveis em camundongos nude que, histologicamente, se assemelham às células tumorais da amostra de biópsia original
- Ploidy status
- Aneuploide
- MSI status
- Estável (MSS)
- Karyotype
- Esta é uma linhagem celular humana quase triploide. O número modal de cromossomos é 68, mas também foram observadas com frequência células com 66, 70 e 71 cromossomos. Os cromossomos X estavam emparelhados, e não foi detectado nenhum cromossomo Y nas preparações coradas com QM.
04Identifiers
- Citation
- NCI-H146 (número de catálogo da Cytion 300182)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1473
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- Receptor do fator de crescimento semelhante à insulina II (IGF II)
- Protein expression
- As células apresentam coloração positiva para vimentina e queratina, mas são negativas para a proteína triplete dos neurofilamentos.
- Antigen expression
- A linhagem apresenta níveis elevados de quatro marcadores bioquímicos: enolase específica de neurônios, isoenzima cerebral da creatina quinase, L-DOPA descarboxilase e imunorreatividade semelhante à da bombesina
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, Produto da frequência fenotípica = 0,0009
- Products
- As células produzem quantidades relativamente elevadas de mRNA do c-myc, mas as sequências de DNA do c-myc não são amplificadas. As células não expressam vasopressina, oxitocina nem o peptídeo liberador de gastrina.
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione ao meio 10% de FBS inativado por calor
- Subculturing
- As células devem ser subcultivadas por meio da transferência de parte da suspensão para frascos de cultura celular novos, pré-preenchidos com meio fresco. Como alternativa, os aglomerados podem ser coletados por centrifugação e ressuspensos em meio fresco.
- Seeding density
- 1 a 2 x 10⁵ células/ml
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- Após o descongelamento, deixe as células se recuperarem do processo de congelamento por pelo menos 24 a 48 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 59 anos
- Ethnicity
- caucasiano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes


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