Přejít na obsah
Buňky NCI-H146
Tkáň
Plíce
Nemoc
Malobuněčný karcinom
Místo metastázy
Kostní dřeň
Synonyma
H146, H-146, NCIH146

Dokumenty

Buňky NCI-H146

Cell line · Číslo výrobku 300182

Buněčná linie NCI-H146 byla izolována A. F. Gazdarem a jeho spolupracovníky v roce 1979 z pleurální tekutiny pacienta s malobuněčným karcinomem plic. Kostní dřeň...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis
Buněčnou linii NCI-H146 odvodili A. F. Gazdar a spolupracovníci v roce 1979 z pleurální tekutiny pacienta s malobuněčným karcinomem plic. Vzorek kostní dřeně byl odebrán před léčbou.
Tkáň
Plíce
Nemoc
Malobuněčný karcinom
Místo metastázy
Kostní dřeň
Synonyma
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Vytváří transplantovatelné nádory u nahých myší, které se histologicky podobají nádorovým buňkám z původního bioptického vzorku
Ploidní stav
Aneuploidní
Stav MSI
Stabilní (MSS)
Karyotyp
Jedná se o téměř triploidní lidskou buněčnou linii. Modální počet chromozomů je 68, ale často se vyskytovaly i buňky s 66, 70 a 71 chromozomy. Chromozomy x byly párové a v preparátech obarvených QM nebyl zjištěn žádný chromozom Y.

04Identifikátory

Citace
NCI-H146 (katalogové číslo Cytion 300182)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1473

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
Receptor pro inzulinu podobný růstový faktor II (IGF II)
Exprese proteinů
Buňky se pozitivně barví na vimentin a keratin, ale jsou negativní na neurofilamentový tripletový protein.
Exprese antigenu
Linie exprimuje zvýšené hladiny čtyř biochemických markerů: neuron specifické enolázy, mozkového izoenzymu kreatinkinázy, L-DOPA dekarboxylázy a imunoreaktivity podobné bombesinu
Isoenzymy
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, součin četnosti fenotypů = 0,0009
Produkty
Buňky produkují poměrně velké množství mRNA c-myc, ale sekvence DNA c-myc se neamplifikují. Buňky neexprimují vazopresin, oxytocin ani gastrin uvolňující peptid.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelně inaktivovaného FBS
Subkultivace
Buňky by měly být subkultivovány přenesením části suspenze do nových baněk pro kultivaci buněk předem naplněných čerstvým médiem. Případně lze shluky odebrat odstředěním a resuspendovat v čerstvém médiu.
Hustota výsevu
1 až 2 x 105 buněk/ml
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení nechte buňky alespoň 24 až 48 hodin zotavovat z procesu zmrazování.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
59 let
Etnická příslušnost
Kavkazský