Mine otse sisu juurde
NCI-H146 rakud
Kude
Kopsud
Haigus
Väikerakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Luuüdi
Sünonüümid
H146, H-146, NCIH146

Dokumendid

NCI-H146 rakud

Cell line · Toote number 300182

NCI-H146 rakuliini eraldasid A.F. Gazdar ja tema kolleegid 1979. aastal väikerakk-kopsuvähiga patsiendi pleuravedelikust. Luuüdi...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus
NCI-H146 rakuliin on saadud A.F. Gazdari ja tema kaaslaste poolt 1979. aastal ühe kopsu väikeserakkulise vähiga patsiendi pleura vedelikust. Luuüdi proov võeti enne ravi.
Kude
Kopsud
Haigus
Väikerakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Luuüdi
Sünonüümid
  • H146
  • H-146
  • NCIH146

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Moodustab alasti hiirtel transplanteeritavaid kasvajaid, mis histoloogiliselt sarnanevad algse biopsiaproovi kasvajarakkudega
Ploidsus
Aneuploidne
MSI staatus
Stabiilne (MSS)
Karyotüüp
See on peaaegu triploidne inimese rakuliin. Modaalne kromosoomide arv on 68, kuid sageli esinesid ka 66, 70 ja 71 kromosoomiga rakud. X-kromosoomid olid paarilised ja Y-kromosoomi ei tuvastatud QM-värvitud preparaatides.

04Tunnused

Viide
NCI-H146 (Cytioni katalooginumber 300182)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1473

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Insuliinilaadse kasvufaktori II retseptor (IGF II)
Valgu ekspressioon
Rakud värvuvad positiivselt vimentiini ja keratiini suhtes, kuid on negatiivsed neurofilamentide triplettvalgu suhtes.
Antigeeni ekspressioon
See liin ekspresseerib nelja biokeemilise markeri kõrgenenud taset: neuronspetsiifiline enolaas, aju kreatiinkinaasi isoensüüm, L-DOPA dekarboksülaas ja bombesiinilaadne immunoreaktiivsus
Isoensüümid
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 1, fenotüübi sageduse toode = 0,0009
Tooted
Rakud toodavad suhteliselt suures koguses c-myc mRNA-d, kuid c-myc DNA järjestused ei amplifitseeru. Rakud ei ekspresseeri vasopressiini, oksütotsiini ega gastriini vabastavat peptiidi.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Kultuuri edasikasvatamine
Rakke tuleks subkultiveerida, viies osa suspensioonist üle värskesse uude rakukultuurikolbi, mis on eelnevalt täidetud värske söötmega. Teise võimalusena võib klastrid koguda tsentrifuugimise teel ja resuspenseerida värskes keskkonnas.
Külvitihedus
1 kuni 2 x 105 rakku/ml
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist laske rakkudel vähemalt 24-48 tundi külmutamisest taastuda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
59 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia