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NRK-IBB-DiHcRed1
Tissu
Rein
Synonymes
NRK IBB-DiHcRed1

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NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Référence du produit 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 est une lignée cellulaire modifiée dérivée de cellules rénales normales de rat (NRK), conçue pour exprimer la protéine fluorescente rouge DiHcRed1. Cette lignée...

€800.00hors taxes et frais de port
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Recommandé (lot le plus récent)
1

01Informations générales

Description

NRK-IBB-DiHcRed1 est une lignée cellulaire modifiée dérivée de cellules de rein de rat normal (NRK), conçue pour exprimer la protéine fluorescente rouge DiHcRed1. Cette modification permet aux chercheurs de suivre et de visualiser les processus cellulaires en temps réel à l'aide de la microscopie à fluorescence. La fluorescence rouge stable est idéale pour l'imagerie des cellules vivantes, facilitant les études sur la migration, la division et la morphologie des cellules.

La lignée cellulaire conserve les caractéristiques typiques des cellules NRK, notamment une morphologie de type épithélial et une prolifération normale, ce qui en fait un modèle fiable pour l'étude du comportement des cellules de mammifères. La fluorescence rouge permet également le multiplexage avec d'autres marqueurs, ce qui renforce son utilisation en biologie cellulaire, dans la recherche sur le cancer et dans le criblage de médicaments.

Tissu
Rein
Synonymes
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Classification

Organisme
Rat
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Cellules de forme fusiforme ressemblant à des fibroblastes

04Identifiants

Référence
NRK-IBB-DiHcRed1 (numéro de catalogue Cytion 500671)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Déposant
Le laboratoire Ellenberg (EMBL)

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Facteur de croissance épidermique (EGF), activité stimulant la multiplication (MSA)
Expression des protéines
IBB-DiHcRed1 : Localisation/gène : 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Produits
Promoteur CMV IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), Néomycine, Phosphotransférase, Facteur de croissance épidermique, activité de stimulation de la multiplication

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 0,5 mg/mL de G418
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Jeter l'ancien milieu et laver les cellules avec du PBS. Ajouter une solution fraîchement préparée de 0,025 % de trypsine/0,02 % d'EDTA chauffée à 37 degrés Celsius et attendre que les cellules se détachent, ce qui prend généralement environ 5 minutes. Neutraliser la trypsine en ajoutant du milieu frais, puis transférer le mélange de cellules dans un tube et centrifuger. Après centrifugation, éliminer le surnageant, remettre le culot cellulaire en suspension dans du milieu de culture frais et transférer la suspension dans de nouveaux flacons. Incorporer G418 dans le milieu de culture pour obtenir une concentration finale de 0,5 mg/ml
Densité de semis
2 à 4 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
OsborneMendel