Μετάβαση στο περιεχόμενο
NRK-IBB-DiHcRed1
Ιστός
Νεφρός
Συνώνυμα
NRK IBB-DiHcRed1

Έγγραφα

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 500671

Το NRK-IBB-DiHcRed1 είναι μια τροποποιημένη κυτταρική σειρά που προέρχεται από φυσιολογικά κύτταρα νεφρού αρουραίου (NRK) και έχει τροποποιηθεί γενετικά ώστε να εκφράζει την κόκκινη φθορίζουσα πρωτεΐνη DiHcRed1. Αυτή η τροποποιημένη...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η NRK-IBB-DiHcRed1 είναι μια τροποποιημένη κυτταρική σειρά που προέρχεται από κύτταρα φυσιολογικού νεφρού αρουραίου (NRK), κατασκευασμένη έτσι ώστε να εκφράζει την κόκκινη φθορίζουσα πρωτεΐνη DiHcRed1. Αυτή η τροποποίηση επιτρέπει στους ερευνητές να παρακολουθούν και να απεικονίζουν κυτταρικές διεργασίες σε πραγματικό χρόνο με τη χρήση μικροσκοπίας φθορισμού. Ο σταθερός κόκκινος φθορισμός είναι ιδανικός για την απεικόνιση ζωντανών κυττάρων, διευκολύνοντας μελέτες σχετικά με τη μετανάστευση, τη διαίρεση και τη μορφολογία των κυττάρων.

Η κυτταρική σειρά διατηρεί τα τυπικά χαρακτηριστικά των κυττάρων NRK, συμπεριλαμβανομένης της επιθηλιοειδούς μορφολογίας και του φυσιολογικού πολλαπλασιασμού, καθιστώντας την ένα αξιόπιστο μοντέλο για τη μελέτη της συμπεριφοράς των κυττάρων θηλαστικών. Ο κόκκινος φθορισμός επιτρέπει επίσης την πολυπλεξία με άλλους δείκτες, ενισχύοντας τη χρήση της στην κυτταρική βιολογία, την έρευνα για τον καρκίνο και τον έλεγχο φαρμάκων.

Ιστός
Νεφρός
Συνώνυμα
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Αρουραίος
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Κύτταρα που μοιάζουν με ινοβλάστες και έχουν φουσκοειδές σχήμα

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
NRK-IBB-DiHcRed1 (αριθμός καταλόγου Cytion 500671)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10116
Κελλοσαύρος
CVCL_AV95
Καταθέτης
Εργαστήριο Ellenberg (EMBL)

05Έκφραση και ευαισθησία

Υποδοχείς που εκφράζονται
Επιδερμικός αυξητικός παράγοντας (EGF), δραστηριότητα διέγερσης του πολλαπλασιασμού (MSA)
Έκφραση πρωτεϊνών
IBB-DiHcRed1: 589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Προϊόντα
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), Νεομυκίνη, Φωσφοτρανσφεράση, Επιδερμικός αυξητικός παράγοντας, δραστηριότητα διέγερσης πολλαπλασιασμού

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS, 0,5 mg/mL G418
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Απορρίψτε το παλιό μέσο και πλύνετε τα κύτταρα με PBS. Προσθέστε ένα φρεσκοπαρασκευασμένο διάλυμα θρυψίνης 0,025%/0,02% EDTA θερμαινόμενο στους 37 βαθμούς Κελσίου και περιμένετε μέχρι να αποκολληθούν τα κύτταρα, το οποίο συνήθως διαρκεί περίπου 5 λεπτά. Εξουδετερώστε τη θρυψίνη προσθέτοντας φρέσκο μέσο, στη συνέχεια μεταφέρετε το μείγμα κυττάρων σε ένα σωληνάριο και φυγοκεντρίστε. Μετά τη φυγοκέντρηση, αφαιρέστε το υπερκείμενο υγρό, ανασυσταθείτε το κυτταρικό σφαιρίδιο σε φρέσκο μέσο καλλιέργειας και μεταφέρετε το εναιώρημα σε νέες φιάλες. Ενσωματώστε το G418 στο μέσο καλλιέργειας ώστε να επιτευχθεί τελική συγκέντρωση 0,5 mg/ml
Πυκνότητα σποράς
2 έως 4 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
OsborneMendel