İçeriğe atla
NRK-IBB-DiHcRed1
Doku
Böbrek
Eş anlamlılar
NRK IBB-DiHcRed1

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Ürün numarası 500671

NRK-IBB-DiHcRed1, normal sıçan böbrek (NRK) hücrelerinden türetilmiş ve kırmızı floresan protein DiHcRed1’i eksprese edecek şekilde tasarlanmış, modifiye edilmiş bir hücre hattıdır. Bu modifiye...

€800.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NRK-IBB-DiHcRed1, normal sıçan böbreği (NRK) hücrelerinden türetilmiş, kırmızı floresan protein DiHcRed1'i ifade edecek şekilde tasarlanmış modifiye bir hücre hattıdır. Bu modifikasyon, araştırmacıların floresan mikroskobu kullanarak hücresel süreçleri gerçek zamanlı olarak izlemelerine ve görselleştirmelerine olanak tanır. Stabil kırmızı floresan, canlı hücre görüntüleme için idealdir ve hücre göçü, bölünmesi ve morfolojisi üzerine çalışmaları kolaylaştırır.

Hücre hattı, epitel benzeri morfoloji ve normal proliferasyon dahil olmak üzere NRK hücrelerinin tipik özelliklerini korur, bu da onu memeli hücre davranışını incelemek için güvenilir bir model haline getirir. Kırmızı floresan ayrıca diğer belirteçlerle çoğullama yapılmasına olanak tanıyarak hücre biyolojisi, kanser araştırmaları ve ilaç taramalarında kullanımını artırır.

Doku
Böbrek
Eş anlamlılar
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Sınıflandırma

Canlı
Sıçan
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fusiform şekilli fibroblast benzeri hücreler

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NRK-IBB-DiHcRed1 (Cytion katalog numarası 500671)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Mevduat sahibi
Ellenberg Laboratuvarı (EMBL)

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
Epidermal büyüme faktörü (EGF), çoğalmayı uyarıcı aktivite (MSA)
Protein ekspresyonu
IBB-DiHcRed1: Konum/gen: 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Ürünler
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), Neomisin, Fosfotransferaz, Epidermal büyüme faktörü, çoğalmayı uyarıcı aktivite

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS, 0,5 mg/mL G418 ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Eski ortamı atın ve hücreleri PBS ile yıkayın. Taze hazırlanmış %0,025 tripsin/%0,02 EDTA çözeltisini 37 santigrat dereceye ısıtarak ekleyin ve hücreler ayrılana kadar bekleyin; bu süre genellikle yaklaşık 5 dakika sürer. Taze besiyeri ekleyerek tripsini nötralize edin, ardından hücre karışımını bir tüpe aktarın ve santrifüjleyin. Santrifüjden sonra süpernatantı çıkarın, hücre peletini taze kültür ortamında yeniden süspanse edin ve süspansiyonu yeni şişelere aktarın. 0,5 mg/ml nihai konsantrasyon elde etmek için kültür ortamına G418 ekleyin
Ekim yoğunluğu
2 ila 4 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
OsborneMendel