Siirry sisältöön
NRK-IBB-DiHcRed1
Kudos
Munuaiset
Synonyymit
NRK IBB-DiHcRed1

Asiakirjat

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Tuotenumero 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 on normaalista rotan munuaisesta (NRK) peräisin oleva muunnettu solulinja, joka on muokattu ilmentämään punaista fluoresoivaa proteiinia DiHcRed1. Tämä muunnettu...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NRK-IBB-DiHcRed1 on muunnettu solulinja, joka on johdettu rotan normaaleista munuaissoluista (NRK) ja joka on muunnettu ilmentämään punaista fluoresoivaa proteiinia DiHcRed1. Tämän muunnoksen ansiosta tutkijat voivat seurata ja visualisoida soluprosesseja reaaliaikaisesti fluoresenssimikroskopian avulla. Vakaa punainen fluoresenssi sopii erinomaisesti elävien solujen kuvantamiseen, mikä helpottaa solujen migraation, jakautumisen ja morfologian tutkimista.

Solulinja säilyttää NRK-soluille tyypilliset ominaisuudet, kuten epiteelin kaltaisen morfologian ja normaalin proliferaation, mikä tekee siitä luotettavan mallin nisäkässolujen käyttäytymisen tutkimiseen. Punainen fluoresenssi mahdollistaa myös multipleksoinnin muiden merkkiaineiden kanssa, mikä parantaa sen käyttöä solubiologiassa, syöpätutkimuksessa ja lääkeseulonnassa.

Kudos
Munuaiset
Synonyymit
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastin kaltaiset solut, joilla on fusiforminen muoto

04Tunnisteet

Lähdeviite
NRK-IBB-DiHcRed1 (Cytionin luettelonumero 500671)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Tallettaja
Ellenbergin laboratorio (EMBL)

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Epiderminen kasvutekijä (EGF), lisääntymistä stimuloiva aktiivisuus (MSA)
Proteiinin ilmentyminen
IBB-DiHcRed1: 589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Tuotteet
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), neomysiini, fosfotransferaasi, epidermaalinen kasvutekijä, lisääntymistä stimuloiva aktiivisuus

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä, 0,5 mg/ml G418:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Hävitä vanha väliaine ja pese solut PBS:llä. Lisätään tuore 0,025-prosenttinen trypsiini/0,02-prosenttinen EDTA-liuos, joka on lämmitetty 37 celsiusasteeseen, ja odotetaan, kunnes solut irtoavat, mikä kestää yleensä noin 5 minuuttia. Neutraloi trypsiini lisäämällä tuoretta elatusainetta, siirrä soluseos putkeen ja sentrifugoi. Sentrifugoinnin jälkeen poista supernatantti, suspendoi solupelletti uudelleen tuoreessa kasvatusmediassa ja siirrä suspensio uusiin pulloihin. Lisää G418:a elatusaineeseen, jotta saavutetaan 0,5 mg/ml:n lopullinen pitoisuus
Kylvötiheys
2–4 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
OsborneMendel