Skip to content
NRK-IBB-DiHcRed1
Tissue
כליה
Synonyms
NRK IBB-DiHcRed1

Documents

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Product number 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 is a modified cell line derived from normal rat kidney (NRK) cells, engineered to express the red fluorescent protein DiHcRed1. This modi...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

NRK-IBB-DiHcRed1 הוא קו תאים מהונדס שמקורו בתאי כליה נורמליים של חולדה (NRK), אשר הונדס כדי לבטא את החלבון הזוהר האדום DiHcRed1. שינוי זה מאפשר לחוקרים לעקוב ולהציג תהליכים תאיים בזמן אמת באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית. הזוהר האדום היציב אידיאלי להדמיית תאים חיים, ומקל על מחקרים בנושא נדידת תאים, חלוקתם ומורפולוגייתם.

קו התאים שומר על המאפיינים הטיפוסיים של תאי NRK, כולל מורפולוגיה דמוית אפיתל וריבוי נורמלי, מה שהופך אותו למודל אמין לחקר התנהגות תאים של יונקים. הזוהר האדום מאפשר גם ריבוי עם סמנים אחרים, מה שמשפר את השימוש בו בביולוגיה תאית, מחקר סרטן וסינון תרופות.

Tissue
כליה
Synonyms
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
תאים דמויי פיברובלסטים בעלי צורה פוספורמית

04Identifiers

Citation
NRK-IBB-DiHcRed1 (מספר קטלוגי Cytion 500671)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Depositor
מעבדת אלנברג (EMBL)

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
פקטור גדילה אפידרמלי (EGF), פעילות מגרה שכפול (MSA)
Protein expression
IBB-DiHcRed1: מיקום/גן: 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Products
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), Neomycin, Phosphotransferase, גורם גדילה אפידרמלי, פעילות מגרה ריבוי

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS, 0.5 מ"ג/מ"ל G418
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
יש להשליך את המדיום הישן ולשטוף את התאים ב-PBS. יש להוסיף תמיסת טריפסין 0.025%/EDTA 0.02% שהוכנה זה עתה, מחוממת ל-37 מעלות צלזיוס, ולהמתין עד שהתאים יתנתקו, מה שלרוב אורך כ-5 דקות. נטרל את הטריפסין על ידי הוספת מדיום טרי, ואז העבר את תערובת התאים לצינור וצנטריפוגה. לאחר הצנטריפוגה, הסר את הנוזל העליון, השעה מחדש את משקע התאים במדיום תרבית טרי, והעבר את התרחיף לבקבוקים חדשים. שלב G418 במדיום התרבית כדי להשיג ריכוז סופי של 0.5 מ"ג/מ"ל
Seeding density
2 עד 4 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
אוסבורן מנדל