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NRK-IBB-DiHcRed1
Pañuelo de papel
Riñón
Sinónimos
NRK IBB-DiHcRed1

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NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Número de producto 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 es una línea celular modificada derivada de células renales normales de rata (NRK), diseñada para expresar la proteína fluorescente roja DiHcRed1. Esta modificación...

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01Información general

Descripción

NRK-IBB-DiHcRed1 es una línea celular modificada derivada de células normales de riñón de rata (NRK), diseñada para expresar la proteína roja fluorescente DiHcRed1. Esta modificación permite a los investigadores seguir y visualizar procesos celulares en tiempo real mediante microscopía de fluorescencia. La fluorescencia roja estable es ideal para la obtención de imágenes de células vivas, lo que facilita los estudios sobre migración, división y morfología celular.

La línea celular conserva las características típicas de las células NRK, incluida la morfología de tipo epitelial y la proliferación normal, lo que la convierte en un modelo fiable para estudiar el comportamiento de las células de mamífero. La fluorescencia roja también permite la multiplexación con otros marcadores, lo que mejora su uso en biología celular, investigación del cáncer y cribado de fármacos.

Pañuelo de papel
Riñón
Sinónimos
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Clasificación

Organismo
Rata
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Células similares a fibroblastos con forma fusiforme

04Identificadores

Referencia
NRK-IBB-DiHcRed1 (número de catálogo de Cytion 500671)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Depositario
Laboratorio Ellenberg (EMBL)

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Factor de crecimiento epidérmico (EGF), actividad estimulante de la multiplicación (MSA)
Expresión de proteínas
IBB-DiHcRed1: Localización/gen: 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Productos
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), Neomicina, Fosfotransferasa, Factor de crecimiento epidérmico, actividad estimulante de la multiplicación

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con 10% FBS, 0,5 mg/mL G418
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Deseche el medio antiguo y lave las células con PBS. Añadir una solución de tripsina al 0,025%/0,02% EDTA recién preparada y calentada a 37 grados Celsius y esperar hasta que las células se desprendan, lo que suele tardar unos 5 minutos. Neutralizar la tripsina añadiendo medio fresco, luego transferir la mezcla celular a un tubo y centrifugar. Tras la centrifugación, eliminar el sobrenadante, resuspender el sedimento celular en medio de cultivo fresco y transferir la suspensión a nuevos matraces. Incorporar G418 al medio de cultivo para alcanzar una concentración final de 0,5 mg/ml
Densidad de siembra
De 2 a 4 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
OsborneMendel