Ga naar de inhoud
NRK-IBB-DiHcRed1
Weefsel
Nieren
Synoniemen
NRK IBB-DiHcRed1

Documenten

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Productnummer 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 is een gemodificeerde cellijn die is afgeleid van normale rattenniercellen (NRK) en die zo is gemanipuleerd dat deze het rode fluorescerende eiwit DiHcRed1 tot expressie brengt. Deze gemodificeerde...

€800.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

NRK-IBB-DiHcRed1 is een gemodificeerde cellijn afgeleid van normale rattenniercellen (NRK), gemodificeerd om het rode fluorescerende eiwit DiHcRed1 tot expressie te brengen. Door deze modificatie kunnen onderzoekers cellulaire processen in real-time volgen en visualiseren met behulp van fluorescentiemicroscopie. De stabiele rode fluorescentie is ideaal voor live-cell imaging en vergemakkelijkt studies naar celmigratie, deling en morfologie.

De cellijn behoudt de typische kenmerken van NRK-cellen, waaronder een epitheliale morfologie en normale proliferatie, waardoor het een betrouwbaar model is voor het bestuderen van zoogdiercelgedrag. De rode fluorescentie maakt ook multiplexing met andere markers mogelijk, wat het gebruik in celbiologie, kankeronderzoek en het screenen van medicijnen verbetert.

Weefsel
Nieren
Synoniemen
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Classificatie

Organisme
Rat
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast-achtige cellen met spoelvormige vorm

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NRK-IBB-DiHcRed1 (Cytion catalogusnummer 500671)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Inlegger
Het Ellenberg Lab (EMBL)

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Epidermale groeifactor (EGF), vermeerderingsstimulerende activiteit (MSA)
Eiwit-expressie
IBB-DiHcRed1: Locatie/gen: 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Producten
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), Neomycine, Fosfotransferase, Epidermale groeifactor, Vermenigvuldigingsstimulerende activiteit

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS, 0,5 mg/mL G418
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Gooi het oude medium weg en was de cellen met PBS. Voeg een vers bereide 0,025% trypsine/0,02% EDTA-oplossing verwarmd tot 37 graden Celsius toe en wacht tot de cellen loskomen, wat meestal ongeveer 5 minuten duurt. Neutraliseer de trypsine door vers medium toe te voegen, breng het celmengsel over naar een buis en centrifugeer. Verwijder na het centrifugeren het supernatant, resuspendeer de celpellet in vers kweekmedium en breng de suspensie over naar nieuwe kolven. Voeg G418 toe aan het kweekmedium om een eindconcentratie van 0,5 mg/ml te bereiken
Zaaidichtheid
2 tot 4 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
OsborneMendel