Gå til innholdet
NRK-IBB-DiHcRed1
Vev
Nyre
Synonymer
NRK IBB-DiHcRed1

Dokumenter

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Produktnummer 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 er en modifisert cellelinje avledet fra normale rottenyreceller (NRK), som er genetisk modifisert til å uttrykke det røde fluorescerende proteinet DiHcRed1. Denne modif...

€800.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

NRK-IBB-DiHcRed1 er en modifisert cellelinje avledet fra normale rottenyreceller (NRK), som er konstruert for å uttrykke det røde fluorescerende proteinet DiHcRed1. Denne modifikasjonen gjør det mulig for forskere å spore og visualisere cellulære prosesser i sanntid ved hjelp av fluorescensmikroskopi. Den stabile røde fluorescensen er ideell for avbildning av levende celler, noe som gjør det enklere å studere cellemigrasjon, celledeling og morfologi.

Cellelinjen beholder de typiske egenskapene til NRK-celler, inkludert epitel-lignende morfologi og normal proliferasjon, noe som gjør den til en pålitelig modell for studier av pattedyrcellers atferd. Den røde fluorescensen gjør det også mulig å multipleksere med andre markører, noe som øker bruken innen cellebiologi, kreftforskning og screening av legemidler.

Vev
Nyre
Synonymer
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Klassifisering

Organisme
Rotte
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastlignende celler med fusiform form

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NRK-IBB-DiHcRed1 (Cytion katalognummer 500671)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Innskjærer
Ellenberg-laboratoriet (EMBL)

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
Epidermal vekstfaktor (EGF), multiplikasjonsstimulerende aktivitet (MSA)
Proteinekspresjon
IBB-DiHcRed1: Plassering/gen: 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Produkter
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), neomycin, fosfotransferase, epidermal vekstfaktor, multiplikasjonsstimulerende aktivitet

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS, 0,5 mg/mL G418
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Kast det gamle mediet, og vask cellene med PBS. Tilsett en nytilberedt 0,025 % trypsin/0,02 % EDTA-løsning oppvarmet til 37 grader Celsius, og vent til cellene løsner, noe som vanligvis tar ca. 5 minutter. Nøytraliser trypsinet ved å tilsette nytt medium, og overfør deretter celleblandingen til et rør og sentrifuger. Etter sentrifugering fjerner du supernatanten, resuspenderer cellepelleten i nytt dyrkingsmedium og overfører suspensjonen til nye kolber. Tilsett G418 i dyrkningsmediet for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 0,5 mg/ml
Såtetthet
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
OsborneMendel