Prejsť na obsah
NRK-IBB-DiHcRed1
Tkanivo
Obličky
Synonymá
NRK IBB-DiHcRed1

Dokumenty

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Číslo výrobku 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 je modifikovaná bunková línia odvodená z buniek normálnej potkanej obličky (NRK), ktorá bola geneticky upravená tak, aby exprimovala červený fluorescenčný proteín DiHcRed1. Táto modifikácia...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

NRK-IBB-DiHcRed1 je modifikovaná bunková línia odvodená od normálnych potkaních obličkových buniek (NRK), vytvorená na expresiu červeného fluorescenčného proteínu DiHcRed1. Táto modifikácia umožňuje výskumníkom sledovať a vizualizovať bunkové procesy v reálnom čase pomocou fluorescenčnej mikroskopie. Stabilná červená fluorescencia je ideálna na zobrazovanie živých buniek, čo uľahčuje štúdie migrácie, delenia a morfológie buniek.

Bunková línia si zachováva typické vlastnosti buniek NRK vrátane epitelovej morfológie a normálnej proliferácie, čo z nej robí spoľahlivý model na štúdium správania buniek cicavcov. Červená fluorescencia tiež umožňuje multiplexovanie s inými markermi, čo zvyšuje jej využitie v bunkovej biológii, výskume rakoviny a skríningu liečiv.

Tkanivo
Obličky
Synonymá
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Klasifikácia

Organizmus
Potkan
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblastom podobné bunky s fusiformným tvarom

04Identifikátory

Citácia
NRK-IBB-DiHcRed1 (katalógové číslo Cytion 500671)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Vkladateľ
Ellenbergova laboratória (EMBL)

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
Epidermálny rastový faktor (EGF), aktivita stimulujúca množenie (MSA)
Expresia proteínov
IBB-DiHcRed1: 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Produkty
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), neomycín, fosfotransferáza, epidermálny rastový faktor, aktivita stimulujúca množenie

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 0,5 mg/ml G418
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Staré médium zlikvidujte a bunky premyte PBS. Pridajte čerstvo pripravený 0,025 % roztok trypsínu/0,02 % EDTA zahriaty na 37 °C a počkajte, kým sa bunky neoddelia, čo zvyčajne trvá asi 5 minút. Neutralizujte trypsín pridaním čerstvého média, potom zmes buniek preneste do skúmavky a odstreďte. Po odstredení odstráňte supernatant, resuspendujte bunkovú peletu v čerstvom kultivačnom médiu a suspenziou prelejte do nových fliaš. Do kultivačného média pridajte G418, aby ste dosiahli konečnú koncentráciu 0,5 mg/ml
Hustota výsevu
2 až 4 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
OsborneMendel