Přejít na obsah
NRK-IBB-DiHcRed1
Tkáň
Ledviny
Synonyma
NRK IBB-DiHcRed1

Dokumenty

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Číslo výrobku 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 je modifikovaná buněčná linie odvozená z buněk normální krysí ledviny (NRK), která byla geneticky upravena tak, aby exprimovala červený fluorescenční protein DiHcRed1. Tato modifikace...

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

NRK-IBB-DiHcRed1 je modifikovaná buněčná linie odvozená z buněk normální ledviny potkana (NRK), která je upravena tak, aby exprimovala červený fluorescenční protein DiHcRed1. Tato modifikace umožňuje výzkumníkům sledovat a vizualizovat buněčné procesy v reálném čase pomocí fluorescenční mikroskopie. Stabilní červená fluorescence je ideální pro zobrazování živých buněk, což usnadňuje studie buněčné migrace, dělení a morfologie.

Buněčná linie si zachovává typické vlastnosti buněk NRK, včetně epiteliální morfologie a normální proliferace, což z ní činí spolehlivý model pro studium chování savčích buněk. Červená fluorescence také umožňuje multiplexování s jinými markery, což zvyšuje její využití v buněčné biologii, výzkumu rakoviny a screeningu léčiv.

Tkáň
Ledviny
Synonyma
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Klasifikace

Organismus
Krysa
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné buňky s fusiformním tvarem

04Identifikátory

Citace
NRK-IBB-DiHcRed1 (katalogové číslo Cytion 500671)
Daňové identifikační číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Vkladatel
Ellenbergova laboratoř (EMBL)

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
Epidermální růstový faktor (EGF), multiplikační stimulační aktivita (MSA)
Exprese proteinů
IBB-DiHcRed1: 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Produkty
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), neomycin, fosfotransferáza, epidermální růstový faktor, aktivita stimulující množení

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium 10% FBS, 0,5 mg/ml G418
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Staré médium zlikvidujte a buňky promyjte PBS. Přidejte čerstvě připravený 0,025% roztok trypsinu/0,02% EDTA zahřátý na 37 °C a počkejte, dokud se buňky neoddělí, což obvykle trvá asi 5 minut. Neutralizujte trypsin přidáním čerstvého média, poté přeneste směs buněk do zkumavky a odstřeďte. Po odstředění odeberte supernatant, resuspendujte buněčnou peletu v čerstvém kultivačním médiu a suspenzi přeneste do nových baněk. Přidejte G418 do kultivačního média, abyste dosáhli konečné koncentrace 0,5 mg/ml
Hustota výsevu
2 až 4 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
OsborneMendel