Перейти до вмісту
NRK-IBB-DiHcRed1
Тканина
Нирка
Синоніми
NRK IBB-DiHcRed1

Документи

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Номер товару 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 — це модифікована клітинна лінія, отримана з клітин нормальної нирки щура (NRK) та генетично модифікована для експресії червоного флуоресцентного білка DiHcRed1. Ця моди...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
1

01Загальна інформація

Опис

NRK-IBB-DiHcRed1 - це модифікована клітинна лінія, отримана з клітин нормальної нирки щура (NRK), сконструйована для експресії червоного флуоресцентного білка DiHcRed1. Ця модифікація дозволяє дослідникам відстежувати та візуалізувати клітинні процеси в режимі реального часу за допомогою флуоресцентної мікроскопії. Стабільна червона флуоресценція ідеально підходить для візуалізації живих клітин, полегшуючи дослідження міграції, поділу та морфології клітин.

Клітинна лінія зберігає типові характеристики клітин NRK, включаючи епітеліоподібну морфологію і нормальну проліферацію, що робить її надійною моделлю для вивчення поведінки клітин ссавців. Червона флуоресценція також дозволяє мультиплексувати з іншими маркерами, що розширює можливості її використання в клітинній біології, дослідженнях раку та скринінгу лікарських засобів.

Тканина
Нирка
Синоніми
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Класифікація

Організм
Щур
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Фібробластоподібні клітини веретеноподібної форми

04Ідентифікатори

Посилання
NRK-IBB-DiHcRed1 (номер за каталогом Cytion 500671)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10116
Целозавр
CVCL_AV95
Вкладник
Лабораторія Елленберга (EMBL)

05Експресія та сприйнятливість

Рецептори, що експресуються
Епідермальний фактор росту (EGF), активність, що стимулює розмноження (MSA)
Експресія білків
IBB-DiHcRed1: Розташування/ген: 1..589 / Pcmv, 656.916 / IBB, 932.1615 , 1670.2356 / HcRed1, 3587.4381 / KanR/NeoR
Продукція
Промотор CMV IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), неоміцин, фосфотрансфераза, епідермальний фактор росту, активність, що стимулює розмноження

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS, 0,5 мг/мл G418
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Викиньте старе середовище і промийте клітини PBS. Додайте свіжоприготований 0,025% розчин трипсину/0,02% розчин ЕДТА, нагрітий до 37 градусів Цельсія, і зачекайте, поки клітини відокремляться, що зазвичай займає близько 5 хвилин. Нейтралізуйте трипсин, додавши свіже середовище, потім перенесіть клітинну суміш у пробірку і центрифугуйте. Після центрифугування видаліть надосадову рідину, ресуспендуйте осад клітин у свіжому живильному середовищі та перенесіть суспензію в нові колби. Додайте G418 в культуральне середовище для досягнення кінцевої концентрації 0,5 мг/мл
Щільність висіву
Від 2 до 4 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
Осборн-Мендель