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NRK-IBB-DiHcRed1
Tissue
Rein
Synonyms
NRK IBB-DiHcRed1

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NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Product number 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 is a modified cell line derived from normal rat kidney (NRK) cells, engineered to express the red fluorescent protein DiHcRed1. This modi...

US$800.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

NRK-IBB-DiHcRed1 est une lignée cellulaire modifiée dérivée de cellules rénales normales de rat (NRK), conçue pour exprimer la protéine fluorescente rouge DiHcRed1. Cette modification permet aux chercheurs de suivre et de visualiser les processus cellulaires en temps réel à l’aide de la microscopie à fluorescence. La fluorescence rouge stable est idéale pour l’imagerie de cellules vivantes, facilitant ainsi les études sur la migration, la division et la morphologie cellulaires.

La lignée cellulaire conserve les caractéristiques typiques des cellules NRK, notamment une morphologie de type épithélial et une prolifération normale, ce qui en fait un modèle fiable pour l’étude du comportement des cellules de mammifères. La fluorescence rouge permet également le multiplexage avec d’autres marqueurs, ce qui en renforce l’utilité en biologie cellulaire, en recherche sur le cancer et dans le criblage de médicaments.

Tissue
Rein
Synonyms
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Cellules de type fibroblastes de forme fusiforme

04Identifiers

Citation
NRK-IBB-DiHcRed1 (numéro de catalogue Cytion 500671)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Depositor
Le laboratoire Ellenberg (EMBL)

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Facteur de croissance épidermique (EGF), activité stimulatrice de la multiplication (MSA)
Protein expression
IBB-DiHcRed1 : Emplacement/gène : 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615, 1670..2356 / HcRed1, 3 587..4 381 / KanR/NeoR
Products
Promoteur IBB du CMV (Ribbeck et Gorlich, 2002), néomycine, phosphotransférase, facteur de croissance épidermique, activité stimulant la multiplication

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 10 % de FBS et 0,5 mg/mL de G418
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Jetez l'ancien milieu et lavez les cellules avec du PBS. Ajouter une solution fraîchement préparée de 0,025 % de trypsine et 0,02 % d’EDTA, chauffée à 37 degrés Celsius, et attendre que les cellules se détachent, ce qui prend habituellement environ 5 minutes. Neutraliser la trypsine en ajoutant du milieu frais, puis transférer le mélange cellulaire dans un tube et centrifuger. Après la centrifugation, retirer le surnageant, remettre le culot cellulaire en suspension dans du milieu de culture frais, puis transférer la suspension dans de nouveaux flacons. Incorporer du G418 dans le milieu de culture pour obtenir une concentration finale de 0,5 mg/ml.
Seeding density
de 2 à 4 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Breed / subspecies
OsborneMendel