Zum Inhalt springen
NRK-IBB-DiHcRed1
Gewebe
Niere
Synonyme
NRK IBB-DiHcRed1

Dokumente

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Artikelnummer 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 ist eine modifizierte Zelllinie, die aus normalen Rattennierenzellen (NRK) gewonnen und so verändert wurde, dass sie das rot fluoreszierende Protein DiHcRed1 exprimiert. Diese modifizierte...

€800.00zzgl. MwSt. und Versandkosten

Anpassung / Empfehlungen

Auf Lager
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

NRK-IBB-DiHcRed1 ist eine modifizierte Zelllinie, die von normalen Rattennierenzellen (NRK) abgeleitet ist und so manipuliert wurde, dass sie das rot fluoreszierende Protein DiHcRed1 exprimiert. Diese Modifikation ermöglicht es Forschern, zelluläre Prozesse mit Hilfe der Fluoreszenzmikroskopie in Echtzeit zu verfolgen und zu visualisieren. Die stabile rote Fluoreszenz ist ideal für die Bildgebung in lebenden Zellen und erleichtert Studien über Zellmigration, -teilung und -morphologie.

Die Zelllinie behält die typischen Merkmale von NRK-Zellen bei, einschließlich epithelialer Morphologie und normaler Proliferation, was sie zu einem zuverlässigen Modell für die Untersuchung des Verhaltens von Säugetierzellen macht. Die rote Fluoreszenz ermöglicht auch das Multiplexing mit anderen Markern, was ihre Verwendung in der Zellbiologie, der Krebsforschung und dem Wirkstoffscreening verbessert.

Gewebe
Niere
Synonyme
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblastenähnliche Zellen mit fusiformer Form

04Bezeichner

Quellenangabe
NRK-IBB-DiHcRed1 (Cytion-Katalognummer 500671)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Einleger
Das Ellenberg-Labor (EMBL)

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Epidermaler Wachstumsfaktor (EGF), Multiplikationsstimulierende Aktivität (MSA)
Proteinexpression
IBB-DiHcRed1: Standort/Gen: 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Produkte
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), Neomycin, Phosphotransferase, Epidermaler Wachstumsfaktor, multiplikationsstimulierende Aktivität

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS, 0,5 mg/mL G418
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Verwerfen Sie das alte Medium und waschen Sie die Zellen mit PBS. Geben Sie eine frisch zubereitete, auf 37 Grad Celsius erhitzte 0,025%ige Trypsin/0,02%ige EDTA-Lösung hinzu und warten Sie, bis sich die Zellen ablösen, was in der Regel etwa 5 Minuten dauert. Neutralisieren Sie das Trypsin durch Zugabe von frischem Medium, überführen Sie das Zellgemisch in ein Röhrchen und zentrifugieren Sie es. Nach der Zentrifugation den Überstand abnehmen, das Zellpellet in frischem Kulturmedium resuspendieren und die Suspension in neue Kolben überführen. G418 in das Kulturmedium einbringen, um eine Endkonzentration von 0,5 mg/ml zu erreichen
Aussaatdichte
2 bis 4 x 104 Zellen/cm2
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
OsborneMendel