الانتقال إلى المحتوى
NRK-IBB-DiHcRed1
الأنسجة
الكلى
المرادفات
NRK IBB-DiHcRed1

المستندات

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · رقم المنتج 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 هو خط خلوي مُعدَّل مشتق من خلايا الكلى الطبيعية للجرذان (NRK)، وقد تم هندسته ليُعبِّر عن البروتين الفلوري الأحمر DiHcRed1. هذا الخط الخلوي المُعدَّل...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

إن NRK-IBB-DiHcRed1 هو خط خلوي معدل مشتق من خلايا كلية الفئران الطبيعية (NRK)، تم تصميمه هندسيًا للتعبير عن البروتين الفلوري الأحمر DiHcRed1. يسمح هذا التعديل للباحثين بتتبع العمليات الخلوية وتصورها في الوقت الحقيقي باستخدام الفحص المجهري الفلوري. ويُعد التألق الأحمر المستقر مثاليًا لتصوير الخلايا الحية، مما يسهل الدراسات حول هجرة الخلايا وانقسامها ومورفولوجيتها.

يحتفظ خط الخلية بالخصائص النموذجية لخلايا NRK، بما في ذلك التشكل الشبيه بالظهارة والتكاثر الطبيعي، مما يجعله نموذجاً موثوقاً لدراسة سلوك خلايا الثدييات. كما يسمح التألق الأحمر أيضًا بمضاعفة الإرسال مع علامات أخرى، مما يعزز استخدامه في بيولوجيا الخلية وأبحاث السرطان وفحص الأدوية.

الأنسجة
الكلى
المرادفات
  • NRK IBB-DiHcRed1

02التصنيف

كائن حي
الجرذ
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
خلايا تشبه الخلايا الليفية ذات الشكل المغزلي

04المعرّفات

المرجع
NRK-IBB-DiHcRed1 (كتالوج سيتيون رقم 500671)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10116
سيلوصور
CVCL_AV95
المودع
مختبر إلينبرغ (EMBL)

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
عامل نمو البشرة (EGF)، النشاط المحفز للتكاثر (MSA)
التعبير البروتيني
IBB-DiHcRed1: الموقع / الجين: 1...589 / Pcmv، 656...916 / IBB، 932...1615، 1670...2356 / HcRed1، 3587...4381 / KanR/NeoR
المنتجات
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002)، نيومايسين، فوسفوترانسفيراز، عامل نمو البشرة، نشاط محفز للتكاثر

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
أضف إلى الوسط 10٪ FBS، 0.5 ملغم/مل G418
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
تخلص من الوسط القديم واغسل الخلايا بمحلول PBS. أضف محلول التربسين المحضر حديثاً بنسبة 0.025% تريبسين/0.02% EDTA المُحضّر حديثاً والمسخن إلى 37 درجة مئوية وانتظر حتى تنفصل الخلايا، وهو ما يستغرق عادةً حوالي 5 دقائق. قم بتحييد التربسين عن طريق إضافة وسط طازج، ثم انقل خليط الخلايا إلى أنبوب وأجهزة الطرد المركزي. بعد الطرد المركزي، قم بإزالة المادة الطافية، وأعد تعليق كريات الخلية في وسط مستنبت جديد، وانقل المعلق إلى قوارير جديدة. ادمج G418 في وسط المستنبت للحصول على تركيز نهائي قدره 0.5 مجم/مل
كثافة البذر
2 إلى 4 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
أوزبورن مندل