Премини към съдържанието
NRK-IBB-DiHcRed1
Тъкан
Бъбреци
Синоними
NRK IBB-DiHcRed1

Документи

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Номер на продукта 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 е модифицирана клетъчна линия, получена от нормални клетки на бъбрек на плъх (NRK), генетично модифицирана да експресира червения флуоресцентен протеин DiHcRed1. Тази моди...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание

NRK-IBB-DiHcRed1 е модифицирана клетъчна линия, получена от нормални плъши бъбречни клетки (NRK), разработена така, че да експресира червения флуоресцентен протеин DiHcRed1. Тази модификация позволява на изследователите да проследяват и визуализират клетъчните процеси в реално време с помощта на флуоресцентна микроскопия. Стабилната червена флуоресценция е идеална за изобразяване на живи клетки, което улеснява изследванията на клетъчната миграция, делене и морфология.

Клетъчната линия запазва типичните характеристики на NRK клетките, включително епителноподобна морфология и нормална пролиферация, което я прави надежден модел за изучаване на поведението на клетките на бозайници. Червената флуоресценция също така позволява мултиплексиране с други маркери, което подобрява използването ѝ в клетъчната биология, изследванията на рака и скрининга на лекарства.

Тъкан
Бъбреци
Синоними
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Класификация

Организъм
Плъх
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Фибробластоподобни клетки с фузиформена форма

04Идентификатори

Източник
NRK-IBB-DiHcRed1 (каталожен номер 500671 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10116
Целозавър
CVCL_AV95
Вложител
Лабораторията на Елънбърг (EMBL)

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
Епидермален растежен фактор (EGF), стимулираща мултипликацията активност (MSA)
Експресия на протеини
IBB-DiHcRed1: Местоположение/ген: 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Продукти
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), неомицин, фосфотрансфераза, епидермален растежен фактор, стимулираща мултипликацията активност

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS, 0,5 mg/ml G418
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Изхвърлете старата среда и промийте клетките с PBS. Добавете прясно приготвен 0,025% разтвор на трипсин/0,02% EDTA, загрят до 37 градуса по Целзий, и изчакайте, докато клетките се отделят, което обикновено отнема около 5 минути. Неутрализирайте трипсина, като добавите прясна среда, след което прехвърлете клетъчната смес в епруветка и центрофугирайте. След центрофугирането отстранете супернатантата, ресуспендирайте клетъчната пелета в прясна хранителна среда и прехвърлете суспензията в нови колби. Включете G418 в хранителната среда, за да достигнете крайна концентрация от 0,5 mg/ml
Плътност на засяването
2 до 4 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
OsborneMendel