Przejdź do treści
NRK-IBB-DiHcRed1
Chusteczka
Nerka
Synonimy
NRK IBB-DiHcRed1

Dokumenty

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Numer produktu 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 to zmodyfikowana linia komórkowa wyhodowana z komórek prawidłowej nerki szczura (NRK), zmodyfikowana genetycznie w celu ekspresji czerwonego białka fluorescencyjnego DiHcRed1. Ta zmodyfikowana...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

NRK-IBB-DiHcRed1 to zmodyfikowana linia komórkowa pochodząca z normalnych szczurzych komórek nerkowych (NRK), zaprojektowana w celu ekspresji czerwonego białka fluorescencyjnego DiHcRed1. Modyfikacja ta pozwala badaczom śledzić i wizualizować procesy komórkowe w czasie rzeczywistym za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej. Stabilna czerwona fluorescencja jest idealna do obrazowania żywych komórek, ułatwiając badania nad migracją, podziałem i morfologią komórek.

Linia komórkowa zachowuje typowe cechy komórek NRK, w tym morfologię podobną do nabłonka i normalną proliferację, co czyni ją niezawodnym modelem do badania zachowania komórek ssaków. Czerwona fluorescencja pozwala również na multipleksowanie z innymi markerami, zwiększając jej zastosowanie w biologii komórki, badaniach nad rakiem i badaniach przesiewowych leków.

Chusteczka
Nerka
Synonimy
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Klasyfikacja

Organizm
Szczur
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Komórki podobne do fibroblastów o wrzecionowatym kształcie

04Identyfikatory

Źródło
NRK-IBB-DiHcRed1 (numer katalogowy Cytion 500671)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Wkładca
Laboratorium Ellenberg (EMBL)

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Epidermalny czynnik wzrostu (EGF), aktywność stymulująca namnażanie (MSA)
Ekspresja białek
IBB-DiHcRed1: Lokalizacja/gen: 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Produkty
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), neomycyna, fosfotransferaza, naskórkowy czynnik wzrostu, aktywność stymulująca namnażanie

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS, 0,5 mg/ml G418
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Wyrzucić starą pożywkę i przepłukać komórki PBS. Dodaj świeżo przygotowany 0,025% roztwór trypsyny/0,02% EDTA podgrzany do 37 stopni Celsjusza i poczekaj, aż komórki się odłączą, co zwykle zajmuje około 5 minut. Zneutralizować trypsynę przez dodanie świeżej pożywki, a następnie przenieść mieszaninę komórek do probówki i odwirować. Po odwirowaniu usunąć supernatant, ponownie zawiesić osad komórkowy w świeżej pożywce i przenieść zawiesinę do nowych kolb. Dodać G418 do podłoża hodowlanego, aby osiągnąć końcowe stężenie 0,5 mg/ml
Gęstość wysiewu
2 do 4 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
OsborneMendel