Skip to content
NRK-IBB-DiHcRed1
Tissue
Thận
Synonyms
NRK IBB-DiHcRed1

Documents

NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Product number 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 is a modified cell line derived from normal rat kidney (NRK) cells, engineered to express the red fluorescent protein DiHcRed1. This modi...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

NRK-IBB-DiHcRed1 là một dòng tế bào biến đổi được phát triển từ tế bào thận chuột bình thường (NRK), được thiết kế để biểu hiện protein huỳnh quang đỏ DiHcRed1. Sự biến đổi này cho phép các nhà nghiên cứu theo dõi và quan sát các quá trình tế bào theo thời gian thực thông qua kính hiển vi huỳnh quang. Huỳnh quang đỏ ổn định là lựa chọn lý tưởng cho hình ảnh tế bào sống, hỗ trợ các nghiên cứu về di chuyển, phân chia và hình thái tế bào.

Dòng tế bào này giữ nguyên các đặc điểm điển hình của tế bào NRK, bao gồm hình thái tương tự biểu mô và khả năng phân chia bình thường, khiến nó trở thành mô hình đáng tin cậy để nghiên cứu hành vi của tế bào động vật có vú. Độ phát huỳnh quang đỏ cũng cho phép kết hợp với các dấu hiệu khác, nâng cao ứng dụng của nó trong sinh học tế bào, nghiên cứu ung thư và sàng lọc thuốc.

Tissue
Thận
Synonyms
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào giống fibroblast có hình dạng fusiform

04Identifiers

Citation
NRK-IBB-DiHcRed1 (Số catalog Cytion 500671)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Depositor
Phòng thí nghiệm Ellenberg (EMBL)

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF), hoạt tính kích thích nhân lên (MSA)
Protein expression
IBB-DiHcRed1: Vị trí/gen: 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615 , 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Products
CMV Promotor IBB (Ribbeck & Gorlich 2002), Neomycin, Phosphotransferase, Yếu tố tăng trưởng biểu bì, Hoạt tính kích thích nhân lên

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 0,5 mg/mL G418
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường cũ và rửa tế bào bằng PBS. Thêm dung dịch trypsin 0,025%/EDTA 0,02% mới pha, đã được làm nóng đến 37 độ Celsius, và chờ cho đến khi tế bào tách ra, thường mất khoảng 5 phút. Trung hòa trypsin bằng cách thêm môi trường tươi, sau đó chuyển hỗn hợp tế bào vào ống và ly tâm. Sau khi ly tâm, loại bỏ dịch trên, tái phân tán cặn tế bào trong môi trường nuôi cấy tươi và chuyển hỗn hợp vào bình mới. Thêm G418 vào môi trường nuôi cấy để đạt nồng độ cuối cùng 0,5 mg/ml
Seeding density
2 đến 4 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
Osborne Mendel