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NRK-IBB-DiHcRed1
Tissue
Rim
Synonyms
NRK IBB-DiHcRed1

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NRK-IBB-DiHcRed1

Cell line · Product number 500671

NRK-IBB-DiHcRed1 is a modified cell line derived from normal rat kidney (NRK) cells, engineered to express the red fluorescent protein DiHcRed1. This modi...

US$800.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

A NRK-IBB-DiHcRed1 é uma linhagem celular modificada derivada de células renais normais de rato (NRK), projetada para expressar a proteína fluorescente vermelha DiHcRed1. Essa modificação permite que os pesquisadores acompanhem e visualizem processos celulares em tempo real por meio da microscopia de fluorescência. A fluorescência vermelha estável é ideal para imagens de células vivas, facilitando estudos sobre migração, divisão e morfologia celular.

A linhagem celular mantém as características típicas das células NRK, incluindo morfologia de tipo epitelial e proliferação normal, tornando-a um modelo confiável para o estudo do comportamento de células de mamíferos. A fluorescência vermelha também permite a multiplexação com outros marcadores, ampliando seu uso na biologia celular, na pesquisa sobre o câncer e na triagem de medicamentos.

Tissue
Rim
Synonyms
  • NRK IBB-DiHcRed1

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Células semelhantes a fibroblastos, com forma fusiforme

04Identifiers

Citation
NRK-IBB-DiHcRed1 (número de catálogo da Cytion 500671)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_AV95
Depositor
Laboratório Ellenberg (EMBL)

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Fator de crescimento epidérmico (EGF), atividade estimuladora da multiplicação (MSA)
Protein expression
IBB-DiHcRed1: Localização/gene: 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615, 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR
Products
Promotor IBB do CMV (Ribbeck & Gorlich 2002), neomicina, fosfotransferase, fator de crescimento epidérmico, atividade estimuladora da multiplicação

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione ao meio 10% de FBS e 0,5 mg/mL de G418
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Descarte o meio antigo e lave as células com PBS. Adicione uma solução recém-preparada de 0,025% de tripsina/0,02% de EDTA aquecida a 37 graus Celsius e aguarde até que as células se desprendam, o que geralmente leva cerca de 5 minutos. Neutralize a tripsina adicionando meio fresco e, em seguida, transfira a mistura celular para um tubo e centrifugue. Após a centrifugação, remova o sobrenadante, ressuspenda o sedimento celular em meio de cultura fresco e transfira a suspensão para novos frascos. Incorpore G418 ao meio de cultura para atingir uma concentração final de 0,5 mg/ml
Seeding density
2 a 4 x 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Breed / subspecies
OsborneMendel