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HROC348Met

Cell line · Référence du produit 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00hors taxes et frais de port
Fabriqué sur commande
1

01Informations générales

Description

HROC348Met est une lignée cellulaire humaine de carcinome colorectal établie à partir d'une métastase hépatique métachronique d'un adénocarcinome colorectal réséqué chez un patient adulte dans le cadre de la collection de modèles HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). La plateforme HROC a été créée grâce à un pipeline standardisé de biobanque et de modélisation tumorale intégrant des annotations cliniques, une caractérisation moléculaire, des xénogreffes dérivées de patients (PDX) et des cultures in vitro correspondantes. HROC348Met représente l'un des modèles métastatiques dérivés de tissus cancéreux colorectaux réséqués chirurgicalement et a été établi dans des conditions de faible passage afin de préserver les caractéristiques biologiques spécifiques à la tumeur.

Au sein de la collection HROC, les échantillons métastatiques - en particulier les métastases hépatiques - ont démontré une efficacité de greffe élevée chez les souris immunodéficientes, avec un taux global de prise de PDX d'environ 68 % dans la cohorte, et un succès encore plus élevé pour les tumeurs métastatiques que pour les tumeurs primaires. Des analyses multivariées ont identifié l'atteinte ganglionnaire et les mutations activatrices dans KRAS et BRAF comme des prédicteurs indépendants de la réussite de l'établissement du modèle. La collection englobe tous les principaux sous-types moléculaires du carcinome colorectal, y compris les tumeurs à instabilité chromosomique (CIN), à phénotype méthylateur des îlots CpG (CIMP), à microsatellites stables (MSS) et à instabilité microsatellitaire élevée (MSI-H), garantissant ainsi la représentativité moléculaire de la maladie à un stade avancé. HROC348Met a été établi dans ce cadre rigoureusement caractérisé, avec une annotation clinicopathologique et moléculaire conforme à des protocoles standardisés.

En tant que modèle de carcinome colorectal dérivé de métastases et à faible passage, HROC348Met convient à l'étude de la biologie des tumeurs métastatiques, des corrélations génotype-phénotype et des tests de réponse thérapeutique dans des conditions de culture 2D et de PDX in vivo. L'approche intégrée de biobanque qui sous-tend sa création garantit la disponibilité de données cliniques correspondantes et, le cas échéant, de matériel de xénogreffe correspondant, permettant ainsi des études translationnelles en oncologie de précision et la prédiction de la réponse aux médicaments.

Tissu
Métastases hépatiques
Maladie
Adénocarcinome
Site métastatique
Foie

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

État du MSI
MSS

04Identifiants

Référence
HROC348Met (numéro de catalogue Cytion 300871)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1U99

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
Tous les 3 à 5 jours
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
77 ans
Origine ethnique
Caucasien