Přejít na obsah
Tkáň
Jaterní metastázy
Nemoc
Adenokarcinom
Místo metastázy
Játra

Dokumenty

HROC348Met

Cell line · Číslo výrobku 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00bez DPH a poštovného
Na zakázku
1

01Obecné informace

Popis

HROC348Met je lidská buněčná linie kolorektálního karcinomu vytvořená z metachronní jaterní metastázy kolorektálního adenokarcinomu resekovaného u dospělého pacienta v rámci modelové sbírky HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Platforma HROC byla vytvořena prostřednictvím standardizovaného biobankingu a modelování nádorů integrujícího klinické anotace, molekulární charakterizaci, xenotransplantáty odvozené od pacientů (PDX) a odpovídající in vitro kultury. HROC348Met představuje jeden z metastatických modelů odvozených z chirurgicky resekované tkáňové tkáně kolorektálního karcinomu a byl vytvořen za podmínek nízkého počtu pasáží, aby se zachovaly biologické vlastnosti specifické pro nádor.

V rámci kolekce HROC vykazovaly metastatické vzorky – zejména metastázy v játrech – vysokou účinnost při štěpování u imunodeficientních myší, s celkovou mírou úspěšnosti PDX přibližně 68 % v celé kohortě, a ještě vyšší úspěšností u metastatických nádorů ve srovnání s primárními nádory. Multivariantní analýzy identifikovaly postižení uzlin a aktivující mutace v KRAS a BRAF jako nezávislé prediktory úspěšného vytvoření modelu. Kolekce zahrnuje všechny hlavní molekulární podtypy kolorektálního karcinomu, včetně chromozomální nestability (CIN), fenotypu metylátoru CpG ostrovů (CIMP), mikrosatelitové stability (MSS) a mikrosatelitové nestability s vysokou mírou (MSI-H), což zajišťuje molekulární reprezentativnost pokročilého stadia onemocnění. HROC348Met byl vytvořen v rámci tohoto přísně charakterizovaného rámce s klinicko-patologickými a molekulárními anotacemi podle standardizovaných protokolů.

Jako model kolorektálního karcinomu odvozený z metastáz s nízkým počtem pasáží je HROC348Met vhodný pro výzkum biologie metastatických nádorů, korelací genotypu a fenotypu a testování terapeutické odpovědi jak v 2D kultuře, tak v in vivo PDX nastavení. Integrovaný přístup biobanky, na kterém je založeno jeho vytvoření, zajišťuje dostupnost odpovídajících klinických dat a, kde je to možné, odpovídajícího xenotransplantátu, což umožňuje translační studie v přesné onkologii a predikci odpovědi na léčbu.

Tkáň
Jaterní metastázy
Nemoc
Adenokarcinom
Místo metastázy
Játra

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Stav MSI
MSS

04Identifikátory

Citace
HROC348Met (katalogové číslo Cytion 300871)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1U99

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
Každých 3 až 5 dní
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
77 let
Etnická příslušnost
Kavkazský