- Tkáň
- Jaterní metastázy
- Nemoc
- Adenokarcinom
- Místo metastázy
- Játra
Dokumenty
HROC348Met
Cell line · Číslo výrobku 300871
HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...
Přizpůsobení / Doporučení
- HROC348MetCell line€800.00
01Obecné informace
- Popis
HROC348Met je lidská buněčná linie kolorektálního karcinomu vytvořená z metachronní jaterní metastázy kolorektálního adenokarcinomu resekovaného u dospělého pacienta v rámci modelové sbírky HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Platforma HROC byla vytvořena prostřednictvím standardizovaného biobankingu a modelování nádorů integrujícího klinické anotace, molekulární charakterizaci, xenotransplantáty odvozené od pacientů (PDX) a odpovídající in vitro kultury. HROC348Met představuje jeden z metastatických modelů odvozených z chirurgicky resekované tkáňové tkáně kolorektálního karcinomu a byl vytvořen za podmínek nízkého počtu pasáží, aby se zachovaly biologické vlastnosti specifické pro nádor.
V rámci kolekce HROC vykazovaly metastatické vzorky – zejména metastázy v játrech – vysokou účinnost při štěpování u imunodeficientních myší, s celkovou mírou úspěšnosti PDX přibližně 68 % v celé kohortě, a ještě vyšší úspěšností u metastatických nádorů ve srovnání s primárními nádory. Multivariantní analýzy identifikovaly postižení uzlin a aktivující mutace v KRAS a BRAF jako nezávislé prediktory úspěšného vytvoření modelu. Kolekce zahrnuje všechny hlavní molekulární podtypy kolorektálního karcinomu, včetně chromozomální nestability (CIN), fenotypu metylátoru CpG ostrovů (CIMP), mikrosatelitové stability (MSS) a mikrosatelitové nestability s vysokou mírou (MSI-H), což zajišťuje molekulární reprezentativnost pokročilého stadia onemocnění. HROC348Met byl vytvořen v rámci tohoto přísně charakterizovaného rámce s klinicko-patologickými a molekulárními anotacemi podle standardizovaných protokolů.
Jako model kolorektálního karcinomu odvozený z metastáz s nízkým počtem pasáží je HROC348Met vhodný pro výzkum biologie metastatických nádorů, korelací genotypu a fenotypu a testování terapeutické odpovědi jak v 2D kultuře, tak v in vivo PDX nastavení. Integrovaný přístup biobanky, na kterém je založeno jeho vytvoření, zajišťuje dostupnost odpovídajících klinických dat a, kde je to možné, odpovídajícího xenotransplantátu, což umožňuje translační studie v přesné onkologii a predikci odpovědi na léčbu.
- Tkáň
- Jaterní metastázy
- Nemoc
- Adenokarcinom
- Místo metastázy
- Játra
02Klasifikace
- Organismus
- Člověk
- Sex
- Muž
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Stav MSI
- MSS
04Identifikátory
- Citace
- HROC348Met (katalogové číslo Cytion 300871)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1U99
05Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Obnova tekutin
- Každých 3 až 5 dní
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
07Dárce
- Věk dárce
- 77 let
- Etnická příslušnost
- Kavkazský
08Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Platí smlouvy s třetími stranami
- Ano