Gå direkte til indholdet
Væv
Levermetastaser
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Lever

Dokumenter

HROC348Met

Cell line · Varenummer 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00ekskl. moms og fragt
Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HROC348Met er en human kolorektal karcinomcellelinje etableret fra en metakron levermetastase af et kolorektalt adenokarcinom resekteret fra en voksen patient inden for HROC-modelsamlingen (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). HROC-platformen blev genereret gennem en standardiseret biobank- og tumormodelleringspipeline, der integrerer klinisk annotering, molekylær karakterisering, patientafledte xenotransplantater (PDX) og tilsvarende in vitro-kulturer. HROC348Met repræsenterer en af de metastatiske modeller, der stammer fra kirurgisk resekteret kolorektal cancervæv, og blev etableret under lavpassageforhold for at bevare tumorspecifikke biologiske egenskaber.

Inden for HROC-samlingen viste metastatiske prøver – især levermetastaser – en høj engraftment-effektivitet i immundefekte mus, med en samlet PDX-take-rate på ca. 68 % på tværs af kohorten og endnu højere succes for metastatiske tumorer sammenlignet med primære tumorer. Multivariate analyser identificerede nodal involvering og aktiverende mutationer i KRAS og BRAF som uafhængige prædiktorer for vellykket modeletablering. Samlingen omfatter alle vigtige molekylære undertyper af kolorektal karcinom, herunder kromosomal ustabilitet (CIN), CpG-ø-methyleringsfænotype (CIMP), mikrosatellitstabil (MSS) og mikrosatellitustabilitet-høj (MSI-H) tumorer, hvilket sikrer molekylær repræsentativitet af sygdom i fremskredent stadium. HROC348Met blev etableret inden for denne strengt karakteriserede ramme med klinisk-patologisk og molekylær annotering i henhold til standardiserede protokoller.

Som en metastaseafledt kolorektal karcinomodel med lav passage er HROC348Met velegnet til undersøgelser af metastatisk tumorbiologi, genotype-fenotype-korrelationer og terapeutisk respons-testning i både 2D-kultur og in vivo PDX-indstillinger. Den integrerede biobank-tilgang, der ligger til grund for dens generering, sikrer tilgængeligheden af matchede kliniske data og, hvor det er relevant, tilsvarende xenotransplantationsmateriale, hvilket muliggør translationelle studier inden for præcisionsonkologi og forudsigelse af lægemiddelrespons.

Væv
Levermetastaser
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Lever

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

MSI-status
MSS

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HROC348Met (Cytion katalognummer 300871)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1U99

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
Hver 3. til 5. dag
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
77 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk