- Tecido
- Metástases hepáticas
- Doença
- Adenocarcinoma
- Local da metástase
- Fígado
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HROC348Met
Cell line · Número do produto 300871
HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...
Personalização / Recomendações
- HROC348MetCell line€800.00
01Informações gerais
- Descrição
HROC348Met é uma linha celular de carcinoma colorretal humano estabelecida a partir de uma metástase hepática metacrónica de um adenocarcinoma colorretal ressecado de um paciente adulto dentro da coleção de modelos HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). A plataforma HROC foi gerada através de um biobanco padronizado e um pipeline de modelagem de tumores que integra anotações clínicas, caracterização molecular, xenoenxertos derivados de pacientes (PDX) e culturas in vitro correspondentes. O HROC348Met representa um dos modelos metastáticos derivados de tecido de cancro colorretal ressecado cirurgicamente e foi estabelecido em condições de baixa passagem para preservar as características biológicas específicas do tumor.
Na coleção HROC, amostras metastáticas — particularmente metástases hepáticas — demonstraram alta eficiência de enxerto em camundongos imunodeficientes, com uma taxa geral de aceitação de PDX de aproximadamente 68% em toda a coorte e sucesso ainda maior para tumores metastáticos em comparação com tumores primários. Análises multivariadas identificaram envolvimento nodal e mutações ativadoras em KRAS e BRAF como preditores independentes do estabelecimento bem-sucedido do modelo. A coleção abrange todos os principais subtipos moleculares de carcinoma colorretal, incluindo instabilidade cromossómica (CIN), fenótipo metilador da ilha CpG (CIMP), tumores estáveis em microssatélites (MSS) e tumores com instabilidade elevada em microssatélites (MSI-H), garantindo a representatividade molecular da doença em estágio avançado. O HROC348Met foi estabelecido dentro desta estrutura rigorosamente caracterizada, com anotação clínico-patológica e molecular de acordo com protocolos padronizados.
Como um modelo de carcinoma colorretal derivado de metástase e de baixa passagem, o HROC348Met é adequado para investigações da biologia do tumor metastático, correlações genótipo-fenótipo e testes de resposta terapêutica em cultura 2D e em ambientes PDX in vivo. A abordagem integrada do biobanco subjacente à sua geração garante a disponibilidade de dados clínicos correspondentes e, quando aplicável, material de xenoenxerto correspondente, permitindo estudos translacionais em oncologia de precisão e previsão da resposta a medicamentos.
- Tecido
- Metástases hepáticas
- Doença
- Adenocarcinoma
- Local da metástase
- Fígado
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Estado do MSI
- MSS
04Identificadores
- Referência
- HROC348Met (número de catálogo Cytion 300871)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1U99
05Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Renovação de fluidos
- A cada 3 a 5 dias
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
07Doador
- Idade do dador
- 77 anos
- Etnia
- Caucasiano
08Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- Aplicam-se os acordos com terceiros
- Sim