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Pañuelo de papel
Metástasis hepática
Enfermedad
Adenocarcinoma
Lugar de metástasis
Hígado

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HROC348Met

Cell line · Número de producto 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00sin impuestos ni gastos de envío
Hecho por encargo
1

01Información general

Descripción

HROC348Met es una línea celular de carcinoma colorrectal humano establecida a partir de una metástasis hepática metacrónica de un adenocarcinoma colorrectal resecado de un paciente adulto dentro de la colección de modelos HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). La plataforma HROC se generó mediante un proceso estandarizado de biobanco y modelización de tumores que integra anotaciones clínicas, caracterización molecular, xenoinjertos derivados de pacientes (PDX) y cultivos in vitro correspondientes. HROC348Met representa uno de los modelos metastásicos derivados de tejido de cáncer colorrectal resecado quirúrgicamente y se estableció en condiciones de bajo paso para preservar las características biológicas específicas del tumor.

Dentro de la colección HROC, las muestras metastásicas, en particular las metástasis hepáticas, demostraron una alta eficiencia de injerto en ratones inmunodeficientes, con una tasa de aceptación general de PDX de aproximadamente el 68 % en toda la cohorte, y un éxito aún mayor para los tumores metastásicos en comparación con los tumores primarios. Los análisis multivariantes identificaron la afectación ganglionar y las mutaciones activadoras en KRAS y BRAF como predictores independientes del establecimiento exitoso del modelo. La colección abarca todos los subtipos moleculares principales del carcinoma colorrectal, incluidos los tumores con inestabilidad cromosómica (CIN), fenotipo metilador de islas CpG (CIMP), microsatélites estables (MSS) y microsatélites altamente inestables (MSI-H), lo que garantiza la representatividad molecular de la enfermedad en estadio avanzado. HROC348Met se estableció dentro de este marco rigurosamente caracterizado, con anotaciones clínico-patológicas y moleculares de acuerdo con protocolos estandarizados.

Como modelo de carcinoma colorrectal derivado de metástasis y de bajo paso, HROC348Met es adecuado para la investigación de la biología de los tumores metastásicos, las correlaciones genotipo-fenotipo y las pruebas de respuesta terapéutica tanto en cultivos 2D como en entornos PDX in vivo. El enfoque integrado de biobanco en el que se basa su generación garantiza la disponibilidad de datos clínicos coincidentes y, cuando procede, del material de xenoinjerto correspondiente, lo que permite realizar estudios traslacionales en oncología de precisión y predicción de la respuesta a los fármacos.

Pañuelo de papel
Metástasis hepática
Enfermedad
Adenocarcinoma
Lugar de metástasis
Hígado

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Estado de MSI
MSS

04Identificadores

Referencia
HROC348Met (número de catálogo de Cytion 300871)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1U99

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
Cada 3 a 5 días
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
77 años
Origen étnico
Caucásico