Перейти до вмісту
Тканина
Метастази в печінці
Хвороба
Аденокарцинома
Місце метастазування
Печінка

Документи

HROC348Met

Cell line · Номер товару 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Виготовляється на замовлення
1

01Загальна інформація

Опис

HROC348Met — це лінія клітин колоректального раку людини, створена на основі метахронного метастазу в печінці колоректального аденокарциноми, видаленого у дорослого пацієнта в рамках колекції моделей HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Платформа HROC була створена за допомогою стандартизованого біобанкінгу та моделювання пухлин, що інтегрує клінічні анотації, молекулярну характеристику, ксенотрансплантати, отримані від пацієнтів (PDX), та відповідні культури in vitro. HROC348Met представляє одну з метастатичних моделей, отриманих з хірургічно видаленої тканини колоректального раку, і була створена в умовах низького пасажу для збереження біологічних особливостей пухлини.

У колекції HROC метастатичні зразки, зокрема метастази в печінці, продемонстрували високу ефективність приживлення в імунодефіцитних мишей, з загальним показником приживлення PDX приблизно 68% у всій когорті, і навіть вищим успіхом для метастатичних пухлин у порівнянні з первинними. Багатофакторний аналіз визначив ураження лімфатичних вузлів та активуючі мутації в KRAS і BRAF як незалежні предиктори успішного створення моделі. Колекція охоплює всі основні молекулярні підтипи колоректального раку, включаючи хромосомну нестабільність (CIN), фенотип метилування CpG-островів (CIMP), мікросателітно стабільні (MSS) та мікросателітно нестабільні (MSI-H) пухлини, забезпечуючи молекулярну репрезентативність захворювання на пізній стадії. HROC348Met було створено в рамках цієї суворо охарактеризованої структури з клініко-патологічними та молекулярними анотаціями відповідно до стандартизованих протоколів.

Як модель колоректального раку, отримана з метастазів, з низьким пасажем, HROC348Met підходить для досліджень біології метастатичних пухлин, кореляцій генотип-фенотип та тестування терапевтичної відповіді як у 2D-культурі, так і в умовах in vivo PDX. Інтегрований підхід біобанку, що лежить в основі його створення, забезпечує доступність відповідних клінічних даних та, де це можливо, відповідного матеріалу ксенотрансплантата, що дозволяє проводити трансляційні дослідження в галузі прецизійної онкології та прогнозування відповіді на ліки.

Тканина
Метастази в печінці
Хвороба
Аденокарцинома
Місце метастазування
Печінка

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Статус MSI
MSS

04Ідентифікатори

Посилання
HROC348Met (номер за каталогом Cytion 300871)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1U99

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
Кожні 3-5 днів
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Вік донора
77 років
Етнічна приналежність
Кавказець