الانتقال إلى المحتوى
الأنسجة
ورم خبيث في الكبد
المرض
السرطان الغدي
موقع الانتشار
الكبد

المستندات

HROC348Met

Cell line · رقم المنتج 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
حسب الطلب
1

01معلومات عامة

الوصف

HROC348Met هو خط خلايا سرطانية بشرية في القولون والمستقيم تم إنشاؤه من ورم خبيث متزامن في الكبد لسرطان غدي في القولون والمستقيم تم استئصاله من مريض بالغ ضمن مجموعة نماذج HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). تم إنشاء منصة HROC من خلال بنك حيوي موحد وخط أنابيب لنمذجة الأورام يدمج التعليقات السريرية والتوصيف الجزيئي والزرع الغريب المشتق من المريض (PDX) والثقافات المختبرية المقابلة. يمثل HROC348Met أحد النماذج النقيلية المشتقة من أنسجة سرطان القولون والمستقيم المستأصلة جراحيًا وتم إنشاؤه في ظل ظروف تمرير منخفضة للحفاظ على السمات البيولوجية الخاصة بالورم.

ضمن مجموعة HROC، أظهرت العينات النقيلية - خاصة النقائل الكبدية - كفاءة عالية في الانغراش في الفئران التي تعاني من نقص المناعة، مع معدل قبول PDX إجمالي يبلغ حوالي 68٪ عبر المجموعة، ونجاح أعلى للأورام النقيلية مقارنة بالأورام الأولية. حددت التحليلات متعددة المتغيرات تورط العقد اللمفاوية والتحورات المنشطة في KRAS و BRAF كعوامل تنبؤ مستقلة لنجاح إنشاء النموذج. تشمل المجموعة جميع الأنواع الفرعية الجزيئية الرئيسية لسرطان القولون والمستقيم، بما في ذلك عدم الاستقرار الكروموسومي (CIN)، ونمط الميثيلات في جزيرة CpG (CIMP)، والأورام المستقرة الميكروساتلية (MSS)، والأورام عالية عدم الاستقرار الميكروساتلية (MSI-H)، مما يضمن التمثيل الجزيئي للمرض في مراحله المتقدمة. تم إنشاء HROC348Met ضمن هذا الإطار المحدد بدقة، مع تعليقات سريرية-باثولوجية وجزيئية وفقًا للبروتوكولات الموحدة.

باعتباره نموذجًا لسرطان القولون والمستقيم منخفض التمرير مشتق من النقائل، فإن HROC348Met مناسب لإجراء أبحاث حول بيولوجيا الأورام النقيلية، والارتباطات بين النمط الجيني والنمط الظاهري، واختبار الاستجابة العلاجية في كل من بيئات الثقافة ثنائية الأبعاد وبيئات PDX الحية. يضمن نهج البنك الحيوي المتكامل الذي يقوم عليه إنشاؤه توفر البيانات السريرية المطابقة، وحيثما أمكن، المواد المزروعة المطابقة، مما يتيح إجراء دراسات مترجمة في علم الأورام الدقيق والتنبؤ باستجابة الأدوية.

الأنسجة
ورم خبيث في الكبد
المرض
السرطان الغدي
موقع الانتشار
الكبد

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

حالة MSI
MSS

04المعرّفات

المرجع
HROC348Met (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300871)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1U99

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
كل 3 إلى 5 أيام
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
77 سنة
الأصل العرقي
قوقازي