- Vävnad
- Levermetastaser
- Sjukdom
- Adenocarcinom
- Metastaseringsställe
- Lever
Dokument
HROC348Met
Cell line · Produktnummer 300871
HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...
Anpassning / Rekommendationer
- HROC348MetCell line€800.00
01Allmän information
- Beskrivning
HROC348Met är en human kolorektal karcinomcellinje som etablerats från en metakron levermetastas av ett kolorektalt adenokarcinom som resekerats från en vuxen patient inom HROC-modellsamlingen (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). HROC-plattformen skapades genom en standardiserad biobank- och tumörmodelleringspipeline som integrerar kliniska anteckningar, molekylär karakterisering, patienthärledda xenotransplantat (PDX) och motsvarande in vitro-odlingar. HROC348Met representerar en av de metastatiska modellerna som härrör från kirurgiskt resekterad kolorektal cancervävnad och etablerades under lågpassageförhållanden för att bevara tumörspecifika biologiska egenskaper.
Inom HROC-samlingen visade metastatiska prover – särskilt levermetastaser – en hög engraftmentseffektivitet hos immunbristmöss, med en total PDX-take-rate på cirka 68 % i hela kohorten, och ännu högre framgång för metastatiska tumörer jämfört med primära tumörer. Multivariata analyser identifierade nodal involvering och aktiverande mutationer i KRAS och BRAF som oberoende prediktorer för framgångsrik modelletablering. Samlingen omfattar alla viktiga molekylära subtyper av kolorektal karcinom, inklusive kromosominstabilitet (CIN), CpG-ö-metylatorfenotyp (CIMP), mikrosatellitstabil (MSS) och mikrosatellitinstabilitet-hög (MSI-H) tumörer, vilket säkerställer molekylär representativitet för sjukdom i avancerat stadium. HROC348Met etablerades inom denna rigoröst karakteriserade ram, med klinisk-patologisk och molekylär annotering enligt standardiserade protokoll.
Som en metastasderiverad kolorektal karcinommodell med låg passage är HROC348Met lämplig för undersökningar av metastatisk tumörbiologi, genotyp-fenotyp-korrelationer och terapeutisk responsprovning i både 2D-odling och in vivo PDX-miljöer. Den integrerade biobankmetoden som ligger till grund för dess generering säkerställer tillgången till matchade kliniska data och, där så är tillämpligt, motsvarande xenotransplantatmaterial, vilket möjliggör translationella studier inom precisionsonkologi och förutsägelse av läkemedelsrespons.
- Vävnad
- Levermetastaser
- Sjukdom
- Adenocarcinom
- Metastaseringsställe
- Lever
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Man
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- MSI-status
- MSS
04Identifierare
- Källa
- HROC348Met (Cytion katalognummer 300871)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1U99
05Hantering och odling
- Odlingsmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Vätskeförnyelse
- Var 3:e till 5:e dag
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
07Donator
- Donatorns ålder
- 77 år
- Etnicitet
- Kaukasisk
08Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal med tredje part gäller
- Ja