Gå direkt till innehållet
Vävnad
Levermetastaser
Sjukdom
Adenocarcinom
Metastaseringsställe
Lever

HROC348Met

Cell line · Produktnummer 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00exkl. moms och frakt
Tillverkas på beställning
1

01Allmän information

Beskrivning

HROC348Met är en human kolorektal karcinomcellinje som etablerats från en metakron levermetastas av ett kolorektalt adenokarcinom som resekerats från en vuxen patient inom HROC-modellsamlingen (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). HROC-plattformen skapades genom en standardiserad biobank- och tumörmodelleringspipeline som integrerar kliniska anteckningar, molekylär karakterisering, patienthärledda xenotransplantat (PDX) och motsvarande in vitro-odlingar. HROC348Met representerar en av de metastatiska modellerna som härrör från kirurgiskt resekterad kolorektal cancervävnad och etablerades under lågpassageförhållanden för att bevara tumörspecifika biologiska egenskaper.

Inom HROC-samlingen visade metastatiska prover – särskilt levermetastaser – en hög engraftmentseffektivitet hos immunbristmöss, med en total PDX-take-rate på cirka 68 % i hela kohorten, och ännu högre framgång för metastatiska tumörer jämfört med primära tumörer. Multivariata analyser identifierade nodal involvering och aktiverande mutationer i KRAS och BRAF som oberoende prediktorer för framgångsrik modelletablering. Samlingen omfattar alla viktiga molekylära subtyper av kolorektal karcinom, inklusive kromosominstabilitet (CIN), CpG-ö-metylatorfenotyp (CIMP), mikrosatellitstabil (MSS) och mikrosatellitinstabilitet-hög (MSI-H) tumörer, vilket säkerställer molekylär representativitet för sjukdom i avancerat stadium. HROC348Met etablerades inom denna rigoröst karakteriserade ram, med klinisk-patologisk och molekylär annotering enligt standardiserade protokoll.

Som en metastasderiverad kolorektal karcinommodell med låg passage är HROC348Met lämplig för undersökningar av metastatisk tumörbiologi, genotyp-fenotyp-korrelationer och terapeutisk responsprovning i både 2D-odling och in vivo PDX-miljöer. Den integrerade biobankmetoden som ligger till grund för dess generering säkerställer tillgången till matchade kliniska data och, där så är tillämpligt, motsvarande xenotransplantatmaterial, vilket möjliggör translationella studier inom precisionsonkologi och förutsägelse av läkemedelsrespons.

Vävnad
Levermetastaser
Sjukdom
Adenocarcinom
Metastaseringsställe
Lever

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

MSI-status
MSS

04Identifierare

Källa
HROC348Met (Cytion katalognummer 300871)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1U99

05Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
Var 3:e till 5:e dag
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
77 år
Etnicitet
Kaukasisk