Pereiti prie turinio
Audinys
Kepenų metastazės
Liga
Adenokarcinoma
Metastazių vieta
Kepenys

Dokumentai

HROC348Met

Cell line · Prekės numeris 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Pagaminta pagal užsakymą
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HROC348Met yra žmogaus kolorektalinės karcinomos ląstelių linija, sukurta iš metachroninės kepenų metastazės, paimtos iš suaugusio paciento, kuriam buvo pašalinta kolorektalinė adenokarcinoma, iš HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) modelių kolekcijos. HROC platforma buvo sukurta naudojant standartizuotą biologinių bankų ir navikų modeliavimo sistemą, integruojančią klinikines anotacijas, molekulinę charakteristiką, pacientų ksenotransplantatus (PDX) ir atitinkamas in vitro kultūras. HROC348Met yra vienas iš metastazinių modelių, gautų iš chirurginiu būdu pašalinto kolorektalinio vėžio audinio, ir buvo sukurtas mažo praėjimo sąlygomis, siekiant išsaugoti navikui būdingas biologines savybes.

HROC kolekcijoje metastaziniai mėginiai, ypač kepenų metastazės, parodė aukštą implantacijos efektyvumą imunodeficituojančiose pelėse, o bendras PDX priėmimo rodiklis visoje kohortoje buvo apie 68 %, o metastaziniai navikai buvo sėkmingesni nei pirminiai navikai. Daugiakriterinė analizė nustatė, kad limfmazgių pažeidimas ir aktyvuojančios mutacijos KRAS ir BRAF yra nepriklausomi sėkmingo modelio sukūrimo prognozės veiksniai. Kolekcija apima visus pagrindinius kolorektalinio karcinomo molekulinės tipus, įskaitant chromosomų nestabilumą (CIN), CpG salos metilatoriaus fenotipą (CIMP), mikrosatelitų stabilumą (MSS) ir mikrosatelitų nestabilumą (MSI-H), užtikrinant molekulinį ligos pažengusios stadijos reprezentatyvumą. HROC348Met buvo sukurtas pagal šį griežtai apibrėžtą sistemą, taikant standartizuotus protokolus klinikopatologiniams ir molekulinėms anotacijoms.

Kaip metastazių kilmės, mažo praėjimo kolorektalinės karcinomos modelis, HROC348Met tinka metastazinių navikų biologijos, genotipo ir fenotipo koreliacijų bei terapinio atsako tyrimams tiek 2D kultūroje, tiek in vivo PDX sąlygomis. Integruotas biobanko metodas, kuriuo grindžiamas jo sukūrimas, užtikrina atitinkamų klinikinių duomenų ir, jei taikoma, atitinkamos ksenotransplantacijos medžiagos prieinamumą, leidžiantį atlikti translacinius tyrimus tiksliojoje onkologijoje ir vaistų atsako prognozavime.

Audinys
Kepenų metastazės
Liga
Adenokarcinoma
Metastazių vieta
Kepenys

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

MSI būsena
MSS

04Identifikatoriai

Nuoroda
HROC348Met (Cytion katalogo numeris 300871)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1U99

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
Kas 3-5 dienas
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
77 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių