Gå til innholdet
Vev
Levermetastaser
Sykdom
Adenokarsinom
Metastaseområde
Lever

Dokumenter

HROC348Met

Cell line · Produktnummer 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00ekskl. mva. og frakt
Lages på bestilling
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HROC348Met er en humant kolorektal karsinomcellelinje etablert fra en metakron levermetastase av et kolorektalt adenokarsinom resektert fra en voksen pasient i HROC-modellsamlingen (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). HROC-plattformen ble generert gjennom en standardisert biobank- og tumormodelleringsprosess som integrerer klinisk annotering, molekylær karakterisering, pasientavledede xenotransplantater (PDX) og tilsvarende in vitro-kulturer. HROC348Met representerer en av de metastatiske modellene avledet fra kirurgisk resektert kolorektal kreftvev og ble etablert under lavpassasjeforhold for å bevare tumorspesifikke biologiske egenskaper.

Innenfor HROC-samlingen viste metastatiske prøver – særlig levermetastaser – høy engraftment-effektivitet hos immunsvake mus, med en samlet PDX-take rate på omtrent 68 % i hele kohorten, og enda høyere suksess for metastatiske tumorer sammenlignet med primære tumorer. Multivariate analyser identifiserte nodal involvering og aktiverende mutasjoner i KRAS og BRAF som uavhengige prediktorer for vellykket modelletablering. Samlingen omfatter alle viktige molekylære subtyper av kolorektal karsinom, inkludert kromosomalt ustabilitet (CIN), CpG-øy-metylatorfenotype (CIMP), mikrosatellittstabil (MSS) og mikrosatellittustabilitet-høy (MSI-H) svulster, noe som sikrer molekylær representativitet for sykdom i avansert stadium. HROC348Met ble etablert innenfor dette strengt karakteriserte rammeverket, med klinisk-patologisk og molekylær annotasjon i henhold til standardiserte protokoller.

Som en metastasebasert kolorektal karsinom-modell med lav passasje er HROC348Met egnet for undersøkelser av metastatisk tumorbiologi, genotype-fenotype-korrelasjoner og terapeutisk respons-testing både i 2D-kultur og in vivo PDX-miljøer. Den integrerte biobank-tilnærmingen som ligger til grunn for genereringen, sikrer tilgjengeligheten av tilpassede kliniske data og, hvor det er aktuelt, tilsvarende xenotransplantatmateriale, noe som muliggjør translasjonsstudier innen presisjonsonkologi og prediksjon av legemiddelrespons.

Vev
Levermetastaser
Sykdom
Adenokarsinom
Metastaseområde
Lever

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

MSI-status
MSS

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HROC348Met (Cytion-katalognummer 300871)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1U99

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
Hver 3. til 5. dag
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
77 år
Etnisitet
Kaukasisk