İçeriğe atla
Doku
Karaciğer metastazı
Hastalık
Adenokarsinom
Metastaz yeri
Karaciğer

HROC348Met

Cell line · Ürün numarası 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00vergi ve kargo hariç
Sipariş üzerine üretilir
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HROC348Met, HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) model koleksiyonunda yer alan yetişkin bir hastadan rezeke edilen kolorektal adenokarsinomun metakronik karaciğer metastazından oluşturulan bir insan kolorektal karsinom hücre hattıdır. HROC platformu, klinik anotasyon, moleküler karakterizasyon, hastadan elde edilen ksenograftlar (PDX) ve ilgili in vitro kültürleri entegre eden standartlaştırılmış bir biyobankacılık ve tümör modelleme süreciyle oluşturulmuştur. HROC348Met, cerrahi olarak rezeke edilmiş kolorektal kanser dokusundan elde edilen metastatik modellerden birini temsil eder ve tümöre özgü biyolojik özellikleri korumak için düşük pasaj koşulları altında oluşturulmuştur.

HROC koleksiyonunda, metastatik örnekler - özellikle karaciğer metastazları - immün yetmezliği olan farelerde yüksek bir greftleme verimliliği göstermiş, kohort genelinde yaklaşık %68'lik bir PDX alım oranı ve primer tümörlere kıyasla metastatik tümörlerde daha da yüksek bir başarı oranı elde edilmiştir. Çok değişkenli analizler, lenf nodu tutulumu ve KRAS ve BRAF'ta aktivasyon mutasyonlarının başarılı model oluşturmanın bağımsız belirleyicileri olduğunu ortaya koymuştur. Koleksiyon, kromozomal instabilite (CIN), CpG ada metilatör fenotipi (CIMP), mikrosatellit stabil (MSS) ve mikrosatellit instabilitesi yüksek (MSI-H) tümörler dahil olmak üzere kolorektal karsinomun tüm önemli moleküler alt tiplerini kapsayarak, ileri evre hastalığın moleküler temsilini sağlamaktadır. HROC348Met, standart protokollere göre klinikopatolojik ve moleküler açıklamalarla, bu titizlikle karakterize edilmiş çerçeve içinde oluşturulmuştur.

Metastaz kaynaklı, düşük geçişli kolorektal karsinom modeli olan HROC348Met, metastatik tümör biyolojisi, genotip-fenotip korelasyonları ve hem 2D kültür hem de in vivo PDX ortamlarında terapötik yanıt testlerinin araştırılması için uygundur. Oluşturulmasının temelini oluşturan entegre biyobank yaklaşımı, eşleşen klinik verilerin ve uygun olduğu durumlarda karşılık gelen ksenograft materyalinin kullanılabilirliğini garanti eder, böylece hassas onkoloji ve ilaç yanıtı tahmininde translasyonel çalışmaların yapılmasına olanak tanır.

Doku
Karaciğer metastazı
Hastalık
Adenokarsinom
Metastaz yeri
Karaciğer

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

MSI durumu
MSS

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HROC348Met (Cytion katalog numarası 300871)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1U99

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
Her 3 ila 5 günde bir
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
77 yıl
Etnik köken
Kafkas