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Tissue
Métastases hépatiques
Disease
Adénocarcinome
Metastatic site
Foie

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HROC348Met

Cell line · Product number 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

US$800.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

HROC348Met est une lignée cellulaire de carcinome colorectal humain issue d’une métastase hépatique métachrone d’un adénocarcinome colorectal réséqué chez un patient adulte, provenant de la collection modèle HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). La plateforme HROC a été mise au point grâce à un processus normalisé de biobanque et de modélisation tumorale intégrant l’annotation clinique, la caractérisation moléculaire, les xénogreffes dérivées de patients (PDX) et les cultures in vitro correspondantes. HROC348Met représente l’un des modèles métastatiques dérivés de tissus de cancer colorectal réséqués chirurgicalement et a été établie dans des conditions de faible nombre de passages afin de préserver les caractéristiques biologiques spécifiques à la tumeur.

Au sein de la collection HROC, les échantillons métastatiques – en particulier les métastases hépatiques – ont démontré une grande efficacité de prise de greffe chez les souris immunodéficientes, avec un taux global de prise de greffe PDX d’environ 68 % dans l’ensemble de la cohorte, et un taux de réussite encore plus élevé pour les tumeurs métastatiques que pour les tumeurs primaires. Des analyses multivariées ont identifié l’atteinte ganglionnaire et les mutations activatrices dans les gènes KRAS et BRAF comme des prédicteurs indépendants de la réussite de l’établissement du modèle. La collection englobe tous les principaux sous-types moléculaires du carcinome colorectal, y compris l’instabilité chromosomique (CIN), le phénotype de méthylation des îlots CpG (CIMP), les tumeurs à microsatellites stables (MSS) et celles présentant une instabilité élevée des microsatellites (MSI-H), garantissant ainsi la représentativité moléculaire de la maladie à un stade avancé. Le modèle HROC348Met a été établi dans ce cadre rigoureusement caractérisé, avec une annotation clinico-pathologique et moléculaire conforme à des protocoles normalisés.

En tant que modèle de carcinome colorectal dérivé de métastases et à faible nombre de passages, HROC348Met convient à l’étude de la biologie des tumeurs métastatiques, des corrélations génotype-phénotype et à l’évaluation de la réponse thérapeutique, tant en culture 2D que dans des modèles PDX in vivo. L’approche de biobanque intégrée qui sous-tend sa création garantit la disponibilité de données cliniques appariées et, le cas échéant, de matériel de xénogreffe correspondant, ce qui permet de mener des études translationnelles en oncologie de précision et de prédire la réponse aux médicaments.

Tissue
Métastases hépatiques
Disease
Adénocarcinome
Metastatic site
Foie

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

MSI status
MSS

04Identifiers

Citation
HROC348Met (numéro de catalogue Cytion 300871)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1U99

05Handling and culture

Culture medium
DMEM : F12 de Ham (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Fluid renewal
Tous les 3 à 5 jours
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donor

Donor age
77 ans
Ethnicity
caucasien