Премини към съдържанието
Тъкан
Метастази в черния дроб
Заболяване
Аденокарцином
Място на метастазите
Черен дроб

Документи

HROC348Met

Cell line · Номер на продукта 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00без ДДС и доставка
Изработва се по поръчка
1

01Обща информация

Описание

HROC348Met е клетъчна линия от човешки колоректален карцином, създадена от метахронен метастаз в черния дроб на колоректален аденокарцином, резециран от възрастен пациент в рамките на колекцията от модели HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Платформата HROC е създадена чрез стандартизирана биобанка и тръбопровод за моделиране на тумори, интегриращ клинични анотации, молекулярна характеристика, ксенографти, получени от пациенти (PDX), и съответни in vitro култури. HROC348Met представлява един от метастатичните модели, получени от хирургично резецирана колоректална ракова тъкан, и е създаден при условия на ниско пасиране, за да се запазят тумор-специфичните биологични характеристики.

В колекцията HROC метастатичните проби – особено чернодробните метастази – демонстрираха висока ефективност на присаждане при имунодефицитни мишки, с обща степен на прием на PDX от приблизително 68% в кохортата и дори по-висок успех за метастатичните тумори в сравнение с първичните. Многовариантните анализи идентифицираха лимфно засягане и активиращи мутации в KRAS и BRAF като независими предиктори за успешно създаване на модел. Колекцията обхваща всички основни молекулярни подтипове на колоректален карцином, включително хромозомна нестабилност (CIN), фенотип на метилатор на CpG острови (CIMP), микросателитна стабилност (MSS) и микросателитна нестабилност с висока степен (MSI-H), като гарантира молекулярна представителност на заболяването в напреднал стадий. HROC348Met е създаден в рамките на тази строго характеризирана рамка, с клиникопатологични и молекулярни анотации съгласно стандартизирани протоколи.

Като модел на колоректален карцином с ниска степен на метастазиране, HROC348Met е подходящ за изследвания на биологията на метастатичните тумори, корелациите между генотип и фенотип и тестване на терапевтичния отговор както в 2D култура, така и в PDX условия in vivo. Интегрираният подход на биобанката, който стои в основата на неговото създаване, гарантира наличието на съответстващи клинични данни и, където е приложимо, съответния ксенографт материал, което позволява транслационни проучвания в прецизната онкология и прогнозиране на реакцията към лекарства.

Тъкан
Метастази в черния дроб
Заболяване
Аденокарцином
Място на метастазите
Черен дроб

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Статус на MSI
MSS

04Идентификатори

Източник
HROC348Met (каталожен номер 300871 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1U99

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
На всеки 3 до 5 дни
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
77 години
Етническа принадлежност
Кавказки