HROC348Met

HROC348Met é uma linhagem celular de carcinoma colorretal humano estabelecida a partir de uma metástase hepática metacrônica de um adenocarcinoma colorretal ressecado de um paciente adulto, pertencente à coleção modelo HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). A plataforma HROC foi desenvolvida por meio de um fluxo de trabalho padronizado de biobanco e modelagem tumoral, integrando anotação clínica, caracterização molecular, xenoenxertos derivados de pacientes (PDX) e as correspondentes culturas in vitro. A HROC348Met representa um dos modelos metastáticos derivados de tecido de câncer colorretal ressecado cirurgicamente e foi estabelecida em condições de baixa passagem para preservar as características biológicas específicas do tumor.

Dentro da coleção HROC, as amostras metastáticas — particularmente as metástases hepáticas — demonstraram alta eficiência de enxerto em camundongos imunodeficientes, com uma taxa geral de aceitação de PDX de aproximadamente 68% em toda a coorte, e sucesso ainda maior para tumores metastáticos em comparação com tumores primários. Análises multivariadas identificaram o envolvimento linfonodal e mutações ativadoras nos genes KRAS e BRAF como preditores independentes do sucesso no estabelecimento do modelo. A coleção abrange todos os principais subtipos moleculares do carcinoma colorretal, incluindo instabilidade cromossômica (CIN), fenótipo de metilação de ilhas CpG (CIMP), tumores com microssatélites estáveis (MSS) e tumores com alta instabilidade de microssatélites (MSI-H), garantindo a representatividade molecular da doença em estágio avançado. O HROC348Met foi estabelecido dentro dessa estrutura rigorosamente caracterizada, com anotações clínico-patológicas e moleculares de acordo com protocolos padronizados.

Por ser um modelo de carcinoma colorretal derivado de metástase e de baixa passagem, o HROC348Met é adequado para investigações sobre a biologia de tumores metastáticos, correlações genótipo-fenótipo e testes de resposta terapêutica, tanto em cultura 2D quanto em ambientes PDX in vivo. A abordagem integrada de biobanco subjacente à sua geração garante a disponibilidade de dados clínicos correspondentes e, quando aplicável, do material de xenoenxerto correspondente, possibilitando estudos translacionais em oncologia de precisão e na previsão da resposta a medicamentos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.