Skip to content
Tissue
גרורות בכבד
Disease
אדנוקרצינומה
Metastatic site
כבד

Documents

HROC348Met

Cell line · Product number 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

US$800.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

HROC348Met הוא קו תאים של קרצינומה קולורקטלית אנושית שהוקם ממטסטזה כבדית מטכרונית של אדנוקרצינומה קולורקטלית שהוסרה מחולה בוגר במסגרת אוסף המודלים HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). פלטפורמת HROC נוצרה באמצעות תהליך סטנדרטי של ביו-בנקאות ומודלים של גידולים, המשלב הערות קליניות, אפיון מולקולרי, שתלים זרים שמקורם בחולים (PDX) ותרבויות מתאימות במבחנה. HROC348Met מייצג אחד המודלים הגרורתיים שמקורם ברקמת סרטן המעי הגס שהוסרה בניתוח, והוקם בתנאים של מעבר נמוך כדי לשמר את המאפיינים הביולוגיים הספציפיים לגידול.

באוסף HROC, דגימות גרורתיות - במיוחד גרורות בכבד - הראו יעילות השתלה גבוהה בעכברים עם חוסר חיסוני, עם שיעור השתלה כולל של PDX של כ-68% בכל הקבוצה, והצלחה גבוהה עוד יותר עבור גרורות בהשוואה לגידולים ראשוניים. ניתוחים רב-משתניים זיהו מעורבות בלוטות לימפה ומוטציות מפעילות ב-KRAS וב-BRAF כגורמים מנבאים עצמאיים להקמת מודל מוצלח. האוסף כולל את כל תתי-הסוגים המולקולריים העיקריים של קרצינומה של המעי הגס, כולל חוסר יציבות כרומוזומלית (CIN), פנוטיפ מתילציה של איי CpG (CIMP), מיקרו-לווין יציב (MSS) וגידולים עם חוסר יציבות מיקרו-לווין גבוהה (MSI-H), מה שמבטיח ייצוגיות מולקולרית של מחלה בשלב מתקדם. HROC348Met הוקם במסגרת מאופיינת בקפדנות זו, עם הערות קליניות-פתולוגיות ומולקולריות בהתאם לפרוטוקולים סטנדרטיים.

כמודל קרצינומה של המעי הגס הנגזר ממטסטזה, בעל מעבר נמוך, HROC348Met מתאים לחקירות של ביולוגיה של גידולים גרורתיים, קורלציות בין גנוטיפ לפנוטיפ ובדיקות תגובה טיפולית הן בתרבית דו-ממדית והן בסביבות PDX in vivo. הגישה המשולבת של בנק ביולוגי העומדת בבסיס יצירתו מבטיחה זמינות של נתונים קליניים תואמים, ובמידת הצורך, חומר שתל זר תואם, המאפשר מחקרים תרגומיים באונקולוגיה מדויקת וחיזוי תגובה לתרופות.

Tissue
גרורות בכבד
Disease
אדנוקרצינומה
Metastatic site
כבד

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

MSI status
MSS

04Identifiers

Citation
HROC348Met (מספר קטלוגי Cytion 300871)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1U99

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
כל 3 עד 5 ימים
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
77 שנים
Ethnicity
קווקזי