Langsung ke isi
Tisu
Metastasis hati
Penyakit
Adenokarsinoma
Lokasi metastasis
Hati

HROC348Met

Cell line · Nomor produk 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Dibuat sesuai pesanan
1

01Informasi umum

Deskripsi

HROC348Met adalah garis sel kanker kolorektal manusia yang didirikan dari metastasis hati metakronus dari adenokarsinoma kolorektal yang diangkat dari pasien dewasa dalam koleksi model HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Platform HROC dikembangkan melalui alur kerja biobanking dan pemodelan tumor yang terstandarisasi, yang mengintegrasikan anotasi klinis, karakterisasi molekuler, xenograft yang berasal dari pasien (PDX), dan kultur in vitro yang sesuai. HROC348Met mewakili salah satu model metastasis yang diisolasi dari jaringan kanker kolorektal yang diangkat secara bedah dan didirikan dalam kondisi passage rendah untuk mempertahankan fitur biologis spesifik tumor.

Dalam koleksi HROC, spesimen metastasis—terutama metastasis hati—menunjukkan efisiensi engraftment yang tinggi pada tikus imunodefisien, dengan tingkat keberhasilan PDX secara keseluruhan sekitar 68% di seluruh kohort, dan keberhasilan yang lebih tinggi untuk metastasis dibandingkan dengan tumor primer. Analisis multivariat mengidentifikasi keterlibatan kelenjar getah bening dan mutasi aktivasi pada KRAS dan BRAF sebagai prediktor independen keberhasilan pembentukan model. Koleksi ini mencakup semua subtipe molekuler utama karsinoma kolorektal, termasuk ketidakstabilan kromosom (CIN), fenotipe metilasi pulau CpG (CIMP), stabil mikrosatelit (MSS), dan tumor ketidakstabilan mikrosatelit tinggi (MSI-H), memastikan representasi molekuler penyakit stadium lanjut. HROC348Met didirikan dalam kerangka kerja yang telah dikarakterisasi secara ketat, dengan anotasi klinis-patologis dan molekuler sesuai dengan protokol standar.

Sebagai model karsinoma kolorektal yang berasal dari metastasis dengan jumlah passage rendah, HROC348Met cocok untuk penelitian biologi tumor metastasis, korelasi genotipe-fenotipe, dan pengujian respons terapeutik baik dalam kultur 2D maupun pengaturan PDX in vivo. Pendekatan biobank terintegrasi yang mendasari pembentukannya memastikan ketersediaan data klinis yang sesuai dan, jika berlaku, material xenograft yang sesuai, memfasilitasi studi translasional dalam onkologi presisi dan prediksi respons obat.

Tisu
Metastasis hati
Penyakit
Adenokarsinoma
Lokasi metastasis
Hati

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Status MSI
MSS

04Pengidentifikasi

Referensi
HROC348Met (Nomor katalog Cytion 300871)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1U99

05Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
Setiap 3 hingga 5 hari
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

07Donatur

Usia donor
77 tahun
Etnis
Kaukasia