Skip to content
Tissue
การแพร่กระจายของมะเร็งไปยังตับ
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Metastatic site
ตับ

Documents

HROC348Met

Cell line · Product number 300871

HROC348Met is a human colorectal carcinoma cell line established from a metachronous liver metastasis of a colorectal adenocarcinoma resected from an adul...

€800.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

HROC348Met เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักของมนุษย์ที่สร้างขึ้นจากมะเร็งที่แพร่กระจายไปยังตับในระยะหลังของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา ซึ่งถูกตัดออกจากผู้ใหญ่ในผู้ป่วยภายในคอลเลกชันโมเดล HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) แพลตฟอร์ม HROC ถูกสร้างขึ้นผ่านกระบวนการมาตรฐานในการจัดเก็บตัวอย่างชีวภาพและการสร้างแบบจำลองเนื้องอก โดยบูรณาการการบันทึกข้อมูลทางคลินิก การวิเคราะห์ลักษณะทางโมเลกุล การปลูกถ่ายเนื้องอกจากผู้ป่วย (PDX) และการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลองที่เกี่ยวข้อง HROC348Met เป็นหนึ่งในแบบจำลองการแพร่กระจายของมะเร็งลำไส้ใหญ่ที่สกัดจากเนื้อเยื่อมะเร็งลำไส้ใหญ่ที่ผ่าตัดออก และถูกสร้างขึ้นภายใต้สภาวะที่มีการผ่านผ่านต่ำเพื่อรักษาลักษณะทางชีวภาพเฉพาะของเนื้องอก

ภายในคอลเลกชันของ HROC ตัวอย่างมะเร็งที่แพร่กระจาย - โดยเฉพาะมะเร็งที่แพร่กระจายไปยังตับ - แสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพการฝังตัวสูงในหนูที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่อง โดยมีอัตราการรับ PDX โดยรวมประมาณ 68% ในกลุ่มตัวอย่างทั้งหมด และประสบความสำเร็จสูงกว่าสำหรับมะเร็งที่แพร่กระจายเมื่อเทียบกับมะเร็งปฐมภูมิ การวิเคราะห์หลายตัวแปรระบุว่าการมีส่วนร่วมของต่อมน้ำเหลืองและการกลายพันธุ์ที่กระตุ้นใน KRAS และ BRAF เป็นปัจจัยทำนายอิสระของการสร้างแบบจำลองที่ประสบความสำเร็จ การรวบรวมนี้ครอบคลุมชนิดย่อยของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักทั้งหมดที่มีลักษณะโมเลกุลสำคัญ รวมถึงชนิดที่มีความไม่เสถียรของโครโมโซม (CIN), ชนิดที่มีลักษณะเมทิลเลชันของเกาะ CpG (CIMP), ชนิดที่มีไมโครแซทเทลไลต์คงที่ (MSS) และชนิดที่มีความไม่เสถียรของไมโครแซทเทลไลต์สูง (MSI-H) เพื่อให้มั่นใจถึงความเป็นตัวแทนทางโมเลกุลของโรคในระยะลุกลาม HROC348Met ถูกจัดตั้งขึ้นภายในกรอบการทำงานที่มีการกำหนดลักษณะอย่างเข้มงวดนี้ โดยมีการบันทึกข้อมูลทางคลินิกพยาธิวิทยาและระดับโมเลกุลตามระเบียบวิธีมาตรฐาน

ในฐานะที่เป็นแบบจำลองมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักที่ได้มาจากมะเร็งที่แพร่กระจายและผ่านการผ่านต่ำ HROC348Met เหมาะสำหรับการศึกษาชีววิทยาของเนื้องอกที่แพร่กระจาย ความสัมพันธ์ระหว่างจีโนไทป์และฟีโนไทป์ และการทดสอบการตอบสนองต่อการรักษาทั้งในวัฒนธรรม 2 มิติและในสภาพแวดล้อม PDX ในร่างกาย การใช้วิธีการธนาคารชีวภาพแบบบูรณาการที่เป็นพื้นฐานในการสร้างแบบจำลองนี้ทำให้มั่นใจได้ว่ามีข้อมูลทางคลินิกที่ตรงกันและวัสดุที่ใช้ในการปลูกถ่ายในสัตว์ทดลองเมื่อสามารถนำมาใช้ได้ ซึ่งช่วยให้สามารถทำการศึกษาการแปลผลทางคลินิกในมะเร็งวิทยาที่แม่นยำและการทำนายการตอบสนองต่อยาได้

Tissue
การแพร่กระจายของมะเร็งไปยังตับ
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Metastatic site
ตับ

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

MSI status
เอ็มเอสเอส

04Identifiers

Citation
HROC348Met (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300871)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1U99

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
ทุก 3 ถึง 5 วัน
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
77 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน