Lignée cellulaire de cardiomyocytes AC16

La lignée cellulaire AC16, dérivée de cellules ventriculaires humaines fusionnées avec des cellules transformées par SV40, présente des caractéristiques typiques des cardiomyocytes, notamment l'expression de facteurs de transcription tels que GATA4, MYCD, NFATc4, et de protéines contractiles telles que les chaînes lourdes de myosine alpha et bêta. Les cellules AC16 expriment également les protéines de jonction lacunaire connexine-43 et connexine-40, avec des jonctions lacunaires fonctionnelles confirmées par des études de couplage de colorants, soulignant leur utilité dans la recherche sur les cardiomyocytes. Lorsque l'oncogène SV40 est réduit au silence, AC16 passe à un état plus différencié, marqué par l'expression de BMP2, qui indique la différenciation cardiaque et la régulation du développement.

En général, les scientifiques utilisent diverses techniques, notamment la différenciation des cellules souches, les modèles animaux, l'analyse moléculaire et la découverte de biomarqueurs, pour faire progresser les connaissances et les thérapies potentielles pour les affections cardiaques. L'implication des voies des mitogènes et de la sénescence, ainsi que l'induction de la thymidine kinase, permettent de mieux comprendre la nature complexe des cardiomyocytes humains et leur réponse à des conditions pathologiques.

La capacité de la lignée cellulaire de cardiomyocytes humains AC16 à imiter le comportement des cardiomyocytes matures en fait un modèle précieux pour la recherche cardiaque. Elle ressemble beaucoup à la composition génétique des cardiomyocytes primaires, ce qui permet d'étudier le développement cardiaque, la pathologie et les implications de la perte d'histones in vitro. Cependant, le comportement des cardiomyocytes et la complexité génétique pourraient ne pas correspondre totalement à ceux des cardiomyocytes primaires ou des cardiomyocytes dérivés de cellules souches. Dans le contexte de la recherche sur la toxicologie et les maladies cardiovasculaires, les cellules AC16 constituent un outil essentiel pour comprendre le développement des cardiomyocytes, l'inflammation, les lésions, la régénération et les effets toxicologiques.

Les propriétés uniques de la lignée cellulaire de cardiomyocytes humains AC16, notamment sa réponse aux signaux de développement et sa capacité à simuler les conditions physiologiques des cardiomyocytes humains, en font un atout indispensable pour élucider les mystères des maladies cardiaques et mettre au point de nouvelles interventions thérapeutiques.

Milieu de culture:DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3,1 g/L Glucose, w : 2,5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0,5 mM Pyruvate de sodium, w : 1,2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a). Compléter le milieu de culture avec 12,5 % de FBS et ajouter 0,9 mM de L-Glutamine pour obtenir une concentration finale de 2,5 mM de L-Glutamine
Milieu de différenciation : DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3,1 g/L Glucose, w : 2,5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0,5 mM Pyruvate de sodium, w : 1,2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a). Pour préparer le milieu de différenciation complet, ajouter 1x ITS+ (Gibco, numéro de catalogue 41400045) et 2% de sérum de cheval (Gibco, numéro de catalogue 16050130).

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie