Linia komórkowa kardiomiocytów AC16

Linia komórkowa AC16, pochodząca z ludzkich komórek komorowych połączonych z transformowanymi komórkami SV40, wykazuje cechy typowe dla kardiomiocytów, w tym ekspresję czynników transkrypcyjnych, takich jak GATA4, MYCD, NFATc4 oraz białek kurczliwych, takich jak łańcuch ciężki alfa- i beta-miozyny. Komórki AC16 wykazują również ekspresję białek połączeń szczelinowych connexin-43 i connexin-40, z funkcjonalnymi połączeniami szczelinowymi potwierdzonymi w badaniach sprzęgania barwników, co podkreśla ich użyteczność w badaniach nad kardiomiocytami. Po wyciszeniu onkogenu SV40, AC16 przechodzi w bardziej zróżnicowany stan, charakteryzujący się ekspresją BMP2, wskazującą na różnicowanie serca i regulację rozwoju.

Ogólnie rzecz biorąc, naukowcy stosują różne techniki, w tym różnicowanie komórek macierzystych, modele zwierzęce, analizę molekularną i odkrywanie biomarkerów, aby poszerzyć wiedzę i potencjalne terapie chorób związanych z sercem. Zaangażowanie szlaków mitogenów i starzenia się, wraz z indukcją kinazy tymidynowej, dodatkowo wyjaśnia złożoną naturę ludzkich kardiomiocytów i ich odpowiedź na warunki patologiczne.

Zdolność ludzkiej linii komórkowej kardiomiocytów AC16 do naśladowania zachowania dojrzałych kardiomiocytów czyni ją cennym modelem do badań kardiologicznych. Ściśle przypomina genetyczny skład pierwotnych kardiomiocytów, umożliwiając badania nad rozwojem serca, patologią i konsekwencjami utraty histonów in vitro, jednak zachowanie kardiomiocytów i złożoność genetyczna mogą nie w pełni odpowiadać kardiomiocytom pierwotnym lub pochodzącym z komórek macierzystych. W kontekście toksykologii i badań nad chorobami układu sercowo-naczyniowego, komórki AC16 służą jako istotne narzędzie do zrozumienia rozwoju kardiomiocytów, stanu zapalnego, urazów, regeneracji i skutków toksykologicznych.

Unikalne właściwości ludzkiej linii komórkowej kardiomiocytów AC16, w tym jej reakcja na sygnały rozwojowe i zdolność do symulacji warunków fizjologicznych ludzkich kardiomiocytów, sprawiają, że jest ona niezbędnym atutem w dążeniu do rozwikłania tajemnic chorób serca i opracowania nowych interwencji terapeutycznych.

Podłoże hodowlane:DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a). Uzupełnić podłoże hodowlane 12,5% FBS i dodać 0,9 mM L-glutaminy, aby osiągnąć końcowe stężenie 2,5 mM L-glutaminy
Pożywka do różnicowania: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a). Aby przygotować kompletną pożywkę do różnicowania, dodaj 1x ITS+ (Gibco, numer katalogowy 41400045) i 2% surowicy końskiej (Gibco, numer katalogowy 16050130).

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym