AC16 – bunková línia kardiomyocytov

Bunková línia AC16, odvodená z ľudských komorových buniek zlúčených s transformáciou SV40, vykazuje vlastnosti typické pre kardiomyocyty vrátane expresie transkripčných faktorov, ako sú GATA4, MYCD, NFATc4, a kontraktilných proteínov, ako sú alfa- a beta-myozínové ťažké reťazce. Bunky AC16 tiež exprimujú proteíny medzery medzi spojmi konexín-43 a konexín-40, pričom funkčné medzery medzi spojmi boli potvrdené štúdiou spojenia farbivom, čo zdôrazňuje ich užitočnosť vo výskume kardiomyocytov. Keď sa onkogén SV40 umlčí, AC16 prejde do diferencovanejšieho stavu, ktorý sa vyznačuje expresiou BMP2, čo svedčí o diferenciácii srdca a regulácii vývoja.

Vo všeobecnosti vedci využívajú rôzne techniky vrátane diferenciácie kmeňových buniek, zvieracích modelov, molekulárnej analýzy a objavovania biomarkerov, aby rozšírili poznatky a potenciálne terapie ochorení súvisiacich so srdcom. Zapojenie mitogénnych a senescenčných dráh spolu s indukciou tymidínkinázy ďalej objasňuje komplexnú povahu ľudských kardiomyocytov a ich reakciu na patologické podmienky.

Schopnosť bunkovej línie ľudských kardiomyocytov AC16 napodobňovať správanie zrelých kardiomyocytov z nej robí cenný model pre výskum srdca. Veľmi sa podobá genetickému zloženiu primárnych kardiomyocytov, čo umožňuje štúdie vývoja srdca, patológie a dôsledkov straty histónov in vitro, avšak správanie kardiomyocytov a ich genetická komplexnosť nemusí úplne zodpovedať správaniu primárnych kardiomyocytov alebo kardiomyocytov odvodených z kmeňových buniek. V kontexte toxikológie a výskumu kardiovaskulárnych ochorení slúžia bunky AC16 ako dôležitý nástroj na pochopenie vývoja kardiomyocytov, zápalu, poškodenia, regenerácie a toxikologických účinkov.

Jedinečné vlastnosti ľudskej kardiomyocytovej bunkovej línie AC16 vrátane jej reakcie na vývojové podnety a schopnosti simulovať fyziologické podmienky ľudských kardiomyocytov z nej robia nenahraditeľný prínos v snahe odhaliť tajomstvá srdcových ochorení a navrhnúť nové terapeutické zásahy.

Kultivačné médium:DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a). Kultivačné médium doplňte 12,5 % FBS a pridajte 0,9 mM L-Glutamínu, aby ste dosiahli konečnú koncentráciu 2,5 mM L-Glutamínu
Diferenciačné médium: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a). Na prípravu kompletného diferenciačného média pridajte 1x ITS+ (Gibco, katalógové číslo 41400045) a 2% konské sérum (Gibco, katalógové číslo 16050130).

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke