Linea cellulare di cardiomiociti AC16

La linea cellulare AC16, derivata da cellule ventricolari umane fuse con SV40-trasformate, presenta caratteristiche tipiche dei cardiomiociti, tra cui l'espressione di fattori di trascrizione come GATA4, MYCD, NFATc4 e proteine contrattili come la catena pesante di alfa e beta-miosina. Le cellule AC16 esprimono anche le proteine gap junction connexina-43 e connexina-40, con giunzioni gap funzionali confermate da studi di dye-coupling, sottolineando la loro utilità nella ricerca sui cardiomiociti. Quando l'oncogene SV40 viene silenziato, AC16 passa a uno stato più differenziato, caratterizzato dall'espressione di BMP2, indicativo del differenziamento cardiaco e della regolazione dello sviluppo.

In generale, gli scienziati impiegano varie tecniche, tra cui la differenziazione delle cellule staminali, i modelli animali, l'analisi molecolare e la scoperta di biomarcatori, per far progredire le conoscenze e le potenziali terapie per le patologie cardiache. Il coinvolgimento di vie mitogene e di senescenza, insieme all'induzione della timidina chinasi, chiarisce ulteriormente la natura complessa dei cardiomiociti umani e la loro risposta alle condizioni patologiche.

La capacità della linea cellulare di cardiomiociti umani AC16 di imitare il comportamento dei cardiomiociti maturi la rende un modello prezioso per la ricerca cardiaca. Essa assomiglia molto alla composizione genetica dei cardiomiociti primari, consentendo studi sullo sviluppo cardiaco, sulla patologia e sulle implicazioni della perdita di istoni in vitro. Tuttavia, il comportamento e la complessità genetica dei cardiomiociti potrebbero non corrispondere completamente a quelli dei cardiomiociti primari o derivati da cellule staminali. Nel contesto della ricerca sulla tossicologia e sulle malattie cardiovascolari, le cellule AC16 rappresentano uno strumento fondamentale per comprendere lo sviluppo dei cardiomiociti, l'infiammazione, le lesioni, la rigenerazione e gli effetti tossicologici.

Le proprietà uniche della linea cellulare di cardiomiociti umani AC16, tra cui la sua risposta ai segnali di sviluppo e la capacità di simulare le condizioni fisiologiche dei cardiomiociti umani, la rendono una risorsa indispensabile per svelare i misteri delle malattie cardiache e ideare nuovi interventi terapeutici.

Terreno di coltura:DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutamina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di piruvato di sodio, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a). Integrare il terreno di coltura con il 12,5% di FBS e aggiungere 0,9 mM di L-Glutamina per ottenere una concentrazione finale di 2,5 mM di L-Glutamina
Terreno di differenziazione: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutamina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di piruvato di sodio, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a). Per preparare il terreno di differenziazione completo, aggiungere 1x ITS+ (Gibco, numero di catalogo 41400045) e 2% di siero di cavallo (Gibco, numero di catalogo 16050130).

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia