AC16 – celična linija kardiomiocitov

Celična linija AC16, pridobljena iz človeških ventrikularnih celic, združenih s transformacijo SV40, ima značilnosti, značilne za kardiomiocite, vključno z izražanjem transkripcijskih dejavnikov, kot so GATA4, MYCD, NFATc4, in kontraktilnih beljakovin, kot sta alfa- in beta-miozinska težka veriga. Celice AC16 izražajo tudi beljakovini vrzeli med celicami koneksin-43 in koneksin-40. Funkcionalne vrzeli so bile potrjene s študijami povezovanja z barvilom, kar poudarja njihovo uporabnost pri raziskavah kardiomiocitov. Ko je onkogen SV40 utišan, AC16 preide v bolj diferencirano stanje, ki ga zaznamuje izražanje BMP2, kar kaže na diferenciacijo srca in uravnavanje razvoja.

Na splošno znanstveniki uporabljajo različne tehnike, vključno z diferenciacijo matičnih celic, živalskimi modeli, molekularno analizo in odkrivanjem biomarkerjev, da bi razširili znanje in potencialne terapije za bolezni, povezane s srcem. Vključenost mitogenih in senescenčnih poti skupaj z indukcijo timidin kinaze dodatno pojasnjuje kompleksno naravo človeških kardiomiocitov in njihov odziv na patološka stanja.

Celična linija človeških kardiomiocitov AC16 lahko posnema obnašanje zrelih kardiomiocitov, zato je dragocen model za raziskave srca. Zelo je podobna genetski sestavi primarnih kardiomiocitov, kar omogoča študije razvoja srca, patologije in posledic izgube histonov in vitro, vendar pa obnašanje kardiomiocitov in njihova genetska kompleksnost morda ne bosta popolnoma ustrezala obnašanju primarnih kardiomiocitov ali kardiomiocitov, pridobljenih iz matičnih celic. V okviru raziskav toksikologije in bolezni srca in ožilja so celice AC16 pomembno orodje za razumevanje razvoja kardiomiocitov, vnetja, poškodb, regeneracije in toksikoloških učinkov.

Zaradi edinstvenih lastnosti celične linije AC16 človeških kardiomiocitov, vključno z odzivom na razvojne signale in sposobnostjo simuliranja fizioloških pogojev človeških kardiomiocitov, je nepogrešljiva pri odkrivanju skrivnosti bolezni srca in oblikovanju novih terapevtskih posegov.

Gojišče:DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a). Gojišče dopolnite z 12,5 % FBS in dodajte 0,9 mM L-glutamina, da dosežete končno koncentracijo 2,5 mM L-glutamina
Diferenciacijsko gojišče: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a). Za pripravo popolnega diferenciacijskega gojišča dodajte 1x ITS+ (Gibco, kataloška številka 41400045) in 2 % konjskega seruma (Gibco, kataloška številka 16050130).

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo