Mine otse sisu juurde
AC16 kardiomüotsüütide rakuliin
Kude
Süda, vatsakeste
Sünonüümid
Human hybrid cardiomyocyte

Dokumendid

AC16 kardiomüotsüütide rakuliin

Cell line · Toote number 305215

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

AC16 rakuliin, mis on saadud SV40-transformeeritud inimese ventrikulaarsetest rakkudest, näitab kardiomüotsüütidele iseloomulikke omadusi, sealhulgas transkriptsioonifaktorite nagu GATA4, MYCD, NFATc4 ja kontraktiilsete valkude nagu alfa- ja beetamüosiini raske ahelaga ekspressiooni. AC16 rakud ekspresseerivad ka lõheühenduste valke connexin-43 ja connexin-40, mille funktsionaalsed lõheühendused on kinnitatud värvainete sidumise uuringutega, mis rõhutab nende kasulikkust kardiomüotsüütide uurimisel. SV40 onkogeeni vaigistamisel muutub AC16 diferentseeritumaks, mida iseloomustab BMP2 ekspressioon, mis viitab südame diferentseerumisele ja arengu regulatsioonile.

Üldiselt kasutavad teadlased erinevaid meetodeid, sealhulgas tüvirakkude diferentseerimist, loomamudeleid, molekulaaranalüüsi ja biomarkerite avastamist, et edendada teadmisi ja võimalikke ravimeetodeid südamega seotud haiguste puhul. Mitogeenide ja vananemisradade kaasamine koos tümidiinkinaasi indutseerimisega selgitab veelgi inimese kardiomüotsüütide keerulist olemust ja nende reaktsiooni patoloogilistele tingimustele.

Inimese kardiomüotsüütide rakuliini AC16 võime jäljendada küpsete kardiomüotsüütide käitumist teeb sellest väärtusliku mudeli südameuuringute jaoks. See sarnaneb lähedalt primaarsete kardiomüotsüütide geneetilisele koostisele, mis võimaldab uurida südame arengut, patoloogiat ja histoonide kadumise mõju in vitro, kuid kardiomüotsüütide käitumine ja geneetiline keerukus ei pruugi täielikult vastata primaarsete või tüvirakkudest saadud kardiomüotsüütide käitumisele. Toksikoloogia ja kardiovaskulaarsete haiguste uurimise kontekstis on AC16 rakud oluline vahend kardiomüotsüütide arengu, põletiku, vigastuse, regenereerimise ja toksikoloogiliste mõjude mõistmiseks.

Inimese kardiomüotsüütide AC16 rakuliini ainulaadsed omadused, sealhulgas selle reaktsioon arengusituatsioonidele ja võime simuleerida inimese kardiomüotsüütide füsioloogilisi tingimusi, muudavad selle asendamatuks abivahendiks südamehaiguste mõistatuste lahendamisel ja uudsete terapeutiliste sekkumiste väljatöötamisel.

Kude
Süda, vatsakeste
Rakendused
Toksikoloogia ja kardiovaskulaarsete haiguste alased teadusuuringud keskenduvad kardiomüotsüütide arengu, põletiku, vigastuse, regeneratsiooni ja toksikoloogiliste mõjude mõistmisele. Teadlased kasutavad erinevaid meetodeid, sealhulgas tüvirakkude diferentseerimist, loomamudeleid, molekulaaranalüüsi ja biomarkerite avastamist, et edendada teadmisi ja võimalikke ravimeetodeid südamega seotud haiguste puhul.
Sünonüümid
  • Human hybrid cardiomyocyte

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This AC16-derived human cardiomyocyte cell line contains an SV40 T-Antigen construct introduced by transfection, supporting conditional immortalization. The construct is stably integrated into uridine-auxotrophic fibroblast-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Rakutüüp
Kardiomüotsüüdid

04Tunnused

Viide
AC16 kardiomüotsüütide rakuliin (Cytioni katalooginumber 305215)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_4U18

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
SV40 suure T-antigeeni poolt transformeeritud

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond

Kultuurikeskkond:DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a). Täiendage kasvukeskkonda 12,5% FBSiga ja lisage 0,9 mM L-Glutamiini, et saavutada lõppkontsentratsioon 2,5 mM L-Glutamiini
Diferentseerimise keskkond: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a). Täieliku diferentseerimissöötme valmistamiseks lisatakse 1x ITS+ (Gibco, katalooginumber 41400045) ja 2% hobuse seerumit (Gibco, katalooginumber 16050130).

Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Etniline kuuluvus
Kaukaasia

10Toote üksikasjad

Koostis tabel