AC16-kardiomyocyttcellelinje

AC16-cellelinjen, som er avledet fra humane ventrikkelceller fusjonert med SV40-transformerte celler, har egenskaper som er typiske for kardiomyocytter, inkludert uttrykk av transkripsjonsfaktorer som GATA4, MYCD, NFATc4 og kontraktile proteiner som alfa- og betamyosintunge kjeder. AC16-celler uttrykker også gap junctions-proteiner som connexin-43 og connexin-40, og funksjonelle gap junctions er bekreftet ved hjelp av fargekoblingsstudier, noe som understreker nytten av dem i kardiomyocyttforskning. Når SV40-onkogenet dempes, går AC16 over i en mer differensiert tilstand, som kjennetegnes av uttrykk av BMP2, noe som indikerer hjertedifferensiering og utviklingsregulering.

Forskere bruker ulike teknikker, blant annet stamcelledifferensiering, dyremodeller, molekylær analyse og oppdagelse av biomarkører, for å utvikle kunnskap og potensielle behandlingsmetoder for hjerterelaterte tilstander. Involveringen av mitogen- og senescensveier, sammen med tymidinkinaseinduksjon, bidrar ytterligere til å belyse den komplekse naturen til humane kardiomyocytter og deres respons på patologiske tilstander.

AC16-cellelinjens evne til å etterligne oppførselen til modne kardiomyocytter gjør den til en verdifull modell for hjerteforskning. Den ligner den genetiske sammensetningen til primære kardiomyocytter, noe som muliggjør studier av hjertets utvikling, patologi og implikasjonene av histontap in vitro, men kardiomyocyttenes atferd og genetiske kompleksitet samsvarer kanskje ikke helt med oppførselen til primære kardiomyocytter eller stamcelleavledede kardiomyocytter. I forbindelse med forskning på toksikologi og hjerte- og karsykdommer er AC16-celler et viktig verktøy for å forstå kardiomyocyttenes utvikling, inflammasjon, skade, regenerering og toksikologiske effekter.

De unike egenskapene til AC16-cellelinjen, inkludert dens respons på utviklingsmessige signaler og evnen til å simulere de fysiologiske forholdene til humane kardiomyocytter, gjør den til en uunnværlig ressurs i jakten på å løse mysteriene rundt hjertesykdommer og utvikle nye terapeutiske intervensjoner.

Kulturmedium:DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a). Tilsett 12,5 % FBS og 0,9 mM L-Glutamin for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 2,5 mM L-Glutamin
Differensieringsmedium: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a). For å lage det komplette differensieringsmediet tilsettes 1x ITS+ (Gibco, katalognummer 41400045) og 2 % hesteserum (Gibco, katalognummer 16050130).

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring